ELISA和RT_PCR技术诊断猪瘟的研究进展_郑长生.pdfVIP

# 48 # 2009 3 ELISA 和R 2PCR 技术诊断 猪瘟的研究进展 1) 2) * 2) 1) 2) ( ,510010; , 434025) 酶联免 吸附试验(ELISA)是将抗原或抗体吸附于固相载体,在载体上进行免 酶染色, 底物显色 后用肉眼或酶联免 测定仪判断结果的一种方法。因本法特异性高, 敏感性强, 检测速度快, 不需特殊设备, 一 次可检测大批标品等优点, 是当前发展最快、最容易, 试剂盒应用最广的一项新技术。而 R 2PCR 是以病毒 RNA 为模板进行反转录, 再以PCR 进行核酸扩增来检测猪瘟病毒的一种有效方法。在此详细了我国目前运用 ELISA 和R 2PCR 技术诊断猪瘟的研究进展, 以便在生产实践中能够迅速做出诊断, 采取相应措施, 减少猪瘟 对猪养殖业造成的损失。 ELISA; R 2PCR; 猪瘟; 诊断; 进展 猪瘟( Classical Swine Fever, CSF) 又称猪霍乱 需特殊设备, 一次可检测大批标品等优点, 是当前发 (Hog Cholera, HC), 是由猪瘟病毒引起的猪的一种 展最快、最容易,试剂盒应用最广的一项新技术。目 急热性致死性疾病。猪瘟具有高度接触传染性, 流 前已被广泛用于各种疾病的实验室诊断。在实际应 行广泛, 发病率高、死亡率高, 危害极大。在 OIE 用过程中, 该技术常不断改进, 形成了多种分析方 (世界动物卫生组织) 制定的5 国际动物卫生法典6 法, 如间接ELISA、夹心ELISA、竞争ELISA、斑点 中, 它被列为A 类 16 种法定传染病之一;在我国制 ELISA、抗原捕获ELISA、PPA2ELISA 等。 定的5家畜家禽防 条例实施细则6 中也被列为一类 1. 1 ELISA 传染病。近年来, 随着猪瘟兔化弱毒 苗的广泛使 间接ELISA 是检测抗体常用的方法。其原理 用, 猪瘟的流行趋势发生了很大的变化。主要表现 为利用酶标记的抗体, 检测与固相抗原结合的受检 在:从频发的大流行转变为无规律的散发性流行; 抗体, 作用后加入底物显色, 然后用酶标仪读数, 判 点显著减少, 临床症状从典型变为非典型, 病原毒力 [2] [3] 定结果 。于涟等 用中国株猪瘟兔化弱毒乳兔组 降低, 病程由急性、亚急性转变为慢性为主, 出现持 织冻干 苗为原料提取猪瘟抗原, 以酶标葡萄球菌 续性感染、胎盘感染、母猪繁殖障碍以及新生仔猪的 蛋白A( PPA) 代替酶标抗猪IgG, 建立ELISA 间接 [ 1] 先天性感染 。猪瘟的非典型性给猪瘟的诊断带来 法检测猪瘟抗体的方法。该方法对 73 份猪血清进 了新的困难。本文介绍了诊断猪瘟的几种方法, 为 行检测猪瘟抗体试验, 敏感性、特异性及准确性分别 在生产中确诊猪瘟, 减少猪瘟的发生提供参考。 为100% 、92. 16% 及 94. 52% 。用该方法对 1 528 头份猪血清及36 头份猪扁桃体浸出液进行猪瘟抗 1 [4] 体测定, 结果稳定, 重复性好。杜伟贤等 用猪瘟兔 酶联接免 吸附剂测定( Enzyme Linked2Im2 化弱毒犊睾细胞苗为材料提取猪瘟病毒抗原