中国部分地区猪流-附件2.DOC

附件2 论文中英文摘要格式 作者姓名：于海 论文题目：中国部分地区猪流感病毒的分子流行病毒研究 作者简介：于海，男，1980年06月出生，2005年09月师从于中国农业科学院哈尔滨兽医研究所童光志研究员，于2008年07月获博士学位。 中 文 摘 要 猪流感（Swine influenza, SI）是由猪流感病毒（Swine influenza virus, SIV）引起的一种急性高度接触传染性的群发性猪呼吸道疾病，具有重要的兽医和人类公共卫生学意义。 为了有效地配合SIV流行病学调查，本研究首先根据SIV的M、HA、NA基因设计了6对引物，分别用于SIV的诊断及H1、H3、H9、N1和N2亚型SIV的快速鉴定。所建立的SIV型和亚型RT-PCR检测方法有很好的特异性，可以检测到102~103EID50的SIV，并在初步的临床样品检测中得到了应用。 为了了解我国SI的流行情况，2005年～2007年，我们先后在黑龙江、河南、山东、浙江、安徽、江西、北京、广东、广西9个省份的不同猪场，进行了600份样品的采集，分离到22株SIV，其中H1N1亚型1株、H3N2亚型4株、H9N2亚型4株。为了检测这9株SIV对哺乳动物的致病性以及在哺乳动物群体内的水平传播能力，我们进行了小鼠致病性试验，试验结果表明：这9株SIV对小鼠的致病力较弱，不引起明显的临床症状，不具备在小鼠之间水平传播的能力，但在感染后的第4天和第8天可以在小鼠的肺组织中分离到病毒。 古典H1N1亚型SIV和禽源H1N1亚型SIV广泛流行于世界范围内的猪群中。关于人源H1N1亚型SIV，世界范围内报道较少。2006年我们在广东省的一猪场分离到1株人源H1N1亚型SIV，并首次在中国进行相关报道。结合华中农业大学最近公布的2株人源H1N1亚型SIV的全基因序列，我们对这3株病毒进行了相关的遗传演化分析。3株SIV的8个基因片段核苷酸同源性分析结果表明，A/swine/Guangdong/96/06与2000年左右的人流感病毒有较高的同源性，8个基因片段核苷酸同源率在98.8~99.6％之间；A/swine/Tianjin/01/04和A/swine/Henan/01/06与1986年左右的人流感病毒有较高的同源性，8个基因片段核苷酸同源率在98.2~100％之间。3株SIV的遗传演化分析结果及HA、NA氨基酸分析结果也均表明，这3株SIV都属于人源谱系的SIV，基本保留了人流感病毒的特性，分别起源于2000年左右的人流感病毒和1986年左右的人流感病毒。这些流感病毒的存在，特别是古老的人流感病毒在猪体内的存在，对我国流感病毒的生态分布和遗传演化研究具有非常重要的意义。 猪具有同时感染禽流感病毒和人流感病毒的能力，被认为是新的流感病毒产生的中间宿主和基因混合器。本研究进行了1970～2006年44株H3N2亚型SIV的遗传演化分析，第一次全面总结和报道了完全人源的、二源重组的和三源重组的H3N2亚型SIV在我国猪群的相互存在。早在1970第一株完全人源的H3N2亚型SIV（Hong Kong/68-like）从台湾省的猪群中分离到，此后Victoria/75-like，Syndney/97-like，New York/99-like和Moscow/99-like的SIV陆续从我国的猪群中分离到；在1980年左右，2株三源重组的H3N2亚型SIV在我国出现，并已经被学者们报道；最近，二源重组的H3N2亚型SIV（HA和NA基因来自人流感病毒，PB2、PB1、PA、NP、M和NS基因来自禽流感病毒）和三源重组的H3N2亚型SIV（HA和NA基因来自人流感病毒，NP基因来自古典的H1N1亚型SIV，PB2、PB1、PA、M和NS基因来自禽流感病毒）在我国猪群中被分离到。这些SIV的存在，特别是重组的SIV的存在，充分地证实了猪确实能作为流感病毒产生的“混合器”，具有重要的人类公共卫生意义，进一步强调了加强我国SIV监控的重要性。 H9N2亚型禽流感病毒不仅可以感染禽，而且也可以感染猪和人。2007年3月，正值猪呼吸与繁殖综合征（PRRS）发病期间，我们在广西省多个猪场共采集50份左右临床样品，同时进行了PRRSV和SIV的RT-PCR检测，其中有4份样品PRRSV和SIV的检测结果都为阳性，并分离出相应的4株PRRSV和SIV，相应的SIV代表毒株命名为A/swine/Guangxi/7/07(H9N2)。序列分析表明，A/swine/Guangxi/7/07的8个基因片段与A/Pigeon/Nanchang/2-0641/00和A/Wild Duck/Nanchang/2-0480/00有较高的同源性，可能起源于A/Duck/Hong Kong/Y280/97-like H