HPLC-RI法测定胃蛋白酶中糖的不确定度评定.pdfVIP

第203101年 第9月期 成都大学学报(自然科学版) V01．3O NO．3 JournalofChengduUniversity(NaturalScienc‘eEdition) Sep．2011 文章编号：1004—5422(2011)03—0214—03 HPLC—RI法测定 胃蛋 白酶中糖的不确定度评定 谢 贞建，颜 军，何 钢 ，苟小军 (成都大学 中药化学实验室，四川 成都 61olo6) 摘 要：通过建立HPLC-RI法测定 胃蛋 白酶中糖含量的数学模型，找出影响不确定度的因素，并对各个影响不 确定度的因素进行评估、计算，由此计算出合成标准不确定度和扩展不确定度．实验结果的合成标准不确定度 为 1．92％，扩展不确定度为4．1％，表明HPLC．RI法测定胃蛋 白酶 中糖的不确定度评定结果可靠． 关键词：不确定度；HPI~RI法；胃蛋白酶；葡萄糖；蔗糖；麦芽糖 中图分类号：0657．72 文献标识码：A (北京赛多利斯天平有限公司)． 0 引 言 1．2 实验方法 测量不确定度，是指表征合理地赋予被测量值 I．2．1 标准储备液的配制 ． 的分散性，与测量结果相关联的参数…，它是对测定 分别精确称取5g(精确至O．0001g)，经过95cc 结果的不可信程度或对测定结果有效性的怀疑程 土2℃干燥2h的葡萄糖、蔗糖、麦芽糖标准品，加适 度．不确定度越小，测量结果的质量越高，使用价值 量 78％乙腈溶解，转移到 100mL容量瓶中，用78％ 越大．由于被测量的真值难以准确复现，因此科学合 乙腈定容至刻度，摇匀，备用． 理地进行测量结果不确定度的分析，并将其应用于 1．2．2 混标配制 ． 测定结果的评定中，对于提高检测结果的质量，降低 分别取等量配制好的葡萄糖、蔗糖、麦芽糖标准 误判风险具有重要现实意义l2j．本文依据 《化学分析 储备液于容量瓶中，78％乙腈定容至刻度，0．45tan 测量不确定度评定》(JJF1135—2005)对HPLC．RI法 微孔膜过滤，备用 ． 测定 胃蛋白酶中糖的不确定度进行评定分析，拟为 1．2．3 样品溶液的配制 ． 含量测定数据的分析与测量结果的准确性和可信度 精确称量研磨成粉末 的样 品 O．5g(精确至 的评判提供一种科学的依据 ． 0．0001g)，加去离子水 10mL溶解后转移到试管中， 于沸水浴中加热 10min，冷却后离心(10000r／min，10 1 材料、仪器与方法 min)，转移到50mL容量瓶中，用 78％乙腈定容至刻 1．1 材料与仪器 度，0．45tan滤膜过滤，入样品瓶中供液相色谱测定． 1．1．1 实验材料． 1．2．4 色谱条件 ． 实验材料包括：葡萄糖、蔗糖、麦芽糖标准品(分 实验的色谱条件为：色谱柱为 D(4．6HIn× 析纯，成都科龙化工试剂厂)，胃蛋 白酶片(重庆格瑞 250illn，5tan)，流动相为乙睛+水(78：22)，流速 1．0mr／ 林药业有限公司)，复方 胃蛋 白酶颗粒(重庆申高生 mLn，柱温30℃，检测器池温度35℃，进样量2o ． 化制药有限公司)，乙腈 (色谱纯，四川航嘉生物医药