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卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’()*!+(*$ 年 月 $%%% !#$%%’()*$+,( .#(/%0$(,( ,- $%%% - 12 . !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 不同哺乳动物细胞表达尿激酶原的研究 钱 锋 肖成祖 高丽华 张正光 郭智霞 俞炜源 (北京生物工程研究所 北京 ) !%%%1! 摘 要 以重组尿激酶原( )为研究对象,构建了细胞表达载体,对不同细胞表达载体进行了较为系统的比 4(056 3 较性研究。确定了所构建 4(056三种载体的表达特性,成功建立了 4(056哺乳动物细胞表达系统。重组+-7-)0 3 3 、 和 /细胞表达 的水平分别是 、 和 /( )。亲和层析纯化 纯度 8-’94( :$% 4(056 $%% !$; %5 !% =9))*$2 4(056 3 3 3 在 以上。免疫吸附溶酰胺测定表明 细胞表达 单链比例最低,而 和 细胞表达 /%? @AB 4(056 ’94( +-7-)8- 4(0 3 3 56单链比例最高。该研究对生产 4(056时,选择更好的哺乳动物细胞表达系统具有重要的指导意义。 3 关键词 尿激酶原, 细胞, 细胞, /细胞,蛋白质稳定性 +-7-)8- ’94( :$% 3 中图分类号 文献标识码 文章编号 ( ) CD!# E !%%%0#%!$%%%%#0%#2/0%2 尿激酶原( ,简称 )是一类 /等细胞作为宿主细胞,以 为对象,研 F4(G4(HIJ-K9 4(056 :$% 4(056 3 3 3 丝氨酸蛋白酶,可以激活体内的纤溶酶原转变成有 究它在不同细胞中表达的特性,希望通过研究筛选 活性的纤溶酶,从而溶解血栓中的纤维蛋白,因此在 出新的更好的生产 4(056 的宿主细胞。 3 溶血栓的治疗方面有着广泛的应用。 4(056 中 !D !/ 3 ! 材料和方法 L K 0)9 间肽键容易被纤溶酶及其他一些酶类水 . 解,生成尿激酶(

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