包涵体蛋白的变复性研究.pdfVIP

　第 19 卷第 1 期 　　　　 科技通报 Vol. 19 　No. 1 2 0 0 3 年 1 月 BULLETIN OF SCIENCE AND TECHNOLOGY 　Jan. 2003 包涵体蛋白的变复性研究 高永贵 　　关怡新 　　姚善泾 (浙江大学化学工程与生物工程学系 , 浙江 杭州 　310027) 摘 　要 :针对基因工程蛋白在 E. coli 中表达多为无活性包涵体的特点 ,介绍了包涵体洗涤和去折叠的方法 、蛋白质 体外折叠的过程和机理 、体外复性技术以及复性蛋白的检测 ,着重讨论了最近发展起来的蛋白质复性新技术. 关 　键 　词 :包涵体 ,去折叠 ,蛋白质复性 ( ) 中图分类号 : 　　文献标识码 :A 　　文章编号 :1001 - 7119 2003 01 - 0010 - 06 Refolding of Genetic Engineering Protein Expressed as Inclusion Bodies GA O Yong - g ui , GUAN Yi - x in , YA O S han - j ing (Depart. of Chem. and Biochem. Eng. , Zhejiang Univ. , Hangzhou 310027 China) Abstract :The genes , of interest are often expressed as inactive inclusion bodies in Escherichia coli , so the methods for resus pending and unfolding inclusion bodies , the pathway and technique of protein refolding in vitro and the determination of renatured protein was overviewed. Especially , the new technique of protein refolding recently developed was emphasized. Key words : inclusion body ; unfolding ; protein renaturation 　　随着基因工程技术的迅猛发展 ,人们越来越多 地通过蛋白质的异源表达为临床和工业生产提供 1 　基因工程蛋白在 E . coli 中的表达 一些蛋白质多肽产品. 迄今为止 , E. coli 以其易于 ( ) 操作 、遗传背景清楚、发酵成本低和蛋白表达水平 革兰氏阴性菌 E. coli 被内膜 又称质膜 和外 高等优点 ,依然是生产重组蛋白的首选表达系统 , 膜分隔成胞 内、周质和胞外三个腔室 , 相应地在 ( 尤其适合表达不经过蛋 白质翻译后修饰 如糖基 E. coli 中表达的异源重组蛋白可