Dh菌株胞外蛋白酶及几丁质酶的活性测定.pdfVIP

哥 北磨 让 学报 2006，15(5)：128～131，135 A(’taAgri(ulturaeBoreali— c‘identalisSinica Dh菌株胞外蛋 白酶及几丁质酶的活性测定 邓小雁 ，朱建兰 (甘肃农业大学草业学 院，甘肃 兰州 730070) 摘 要 ：对 Dh菌株 的胞外蛋 白酶及几丁质酶 的活性进行 了测定 ，发现该菌 的胞外蛋 白酶足 以碱性蛋 白酶为 主 ，兼含中性和酸忡蛋 白酶组成 的复合酶系 ，其 中中性蛋 白酶对酸碱和温度 的稳定性较好 ，最适作用温度为 45C；该茼胞外蛋 [j酶在虫尸培养基和明胶培养基上均可活跃地产生 ，不同温度 下在明胶一琼脂平板培养基 上培养3d后用 15 HgC1处理后菌落周 围显示 出清 晰透 明的环状 ，产酶量在 33C时达到最大值 ，随后减少 ； 几丁质酶产酶高峰 出现在 4～5d。 关键词 ：Dh菌 ；胞外蛋 白酶 ；几丁质酶 ；活性 中图分类号 ：Q55 文献标 识码 ：A 文章编号 ：1004—1389(2006)05—0128一O4 AssayofActivityofExtracellularProteasesandChitinofDhStrain DENG Xiao—yanandZHU Jian—lan (C-rasslandScienceCollegeofGansuAgriculturalUniversity，lanzhou 730070，China) Abstract：Thispaperinvestigated theassay0factivityOfextracellularproteasesandchitinaseOfDh strainofEmericellaq“n rf n￡n fungi，theresultshowedthatthesystem includedacid，neutraland alkalineprotease，amongwhichtheneutralproteasewasthemoststabletotemperatureandacidity． Theoptimaltemperatureofproteaseactivitywas45。C ；Theextracellularproteasescouldgenerateac— tivelyinworm ashesandglutinculturemedium．AfterDhwascuturedforthreedays。colonycircum— ferenceshowedclearlyandtransparentannulusontheglutin——agarculturemedium withdifferenttern—— peraturethrough treating with 15 HgC1．Theproduction ofprotease reached maximum ，then re— duced；Productionmaximum ofchitinaseappeared4～ 5days． Keywords：Dhstrain；Extracellularproteases；Chitinase；Activity Dh菌株是从沙枣尺蠖 (Apocheimacinerari一 维素和酚类化合物 的酶或酶系，它们在血细胞及 “)上分离到 的虫生真菌，经鉴定为 四脊裸胞壳 其他组织降解与昆虫机体免疫的诱导 中发挥着重 (Emeri~’ellaquadri~l‘ineata) 。虫生真 菌 是一 要作用 。本文着重论述对 Dh菌株 的胞外蛋 白 类重要的杀虫微生物 ，一般是通过体壁穿透方式 酶活性及几丁质酶活性的测定及其特性。 感染并致死寄主。虫生真菌在侵入过程中遭遇到 的主要障碍是 由蛋 白质、几丁质和脂类等物质构 材料与方法 成的昆虫体壁 。虫生真菌穿透寄主体壁可 以通过 1．1 供试菌种 胞子萌发形成芽管或侵