γ-谷氨酸高产菌株的选育及发酵条件优化.pdfVIP

第 4O卷 第 2期 河南大学学报(自然科学版) Vo1．40 NO．2 2010年 3月 JournalofHenanUniversity(NaturalScience) M ar．2O1O 一 聚谷氨酸高产菌株的选育及发酵条件优化 杜 沛，宴 正，陈双喜 (河南大学 生命科学学院 生物工程研 究所 ，河南 开封 475004) 摘 要 ：以聚谷氨酸(7一PGA)产生菌 BacillussubtilisHD-23为 出发菌株 ，采用紫外线一硫酸二 乙酯一亚硝基胍三 因素的多组复合诱变 ，获得菌株 BacillussubtilisHD-F9，7-PGA产率达到 10．72g／I，提高了56．3 ，且传代稳定． 对菌株 BacillussubtilisHD-F9的发酵培养基配比进行正交设计优化 ，并对其摇瓶培养条件进行优化 ，得到最佳发 酵条件为 ：葡萄糖 50g／I，酵母膏 8g／I，谷氨酸钠 40g／I，250m1三角瓶装液 40ml，初始 pH 7．5，37℃， 200r／rain，振荡培养 48h，PGA产量可达 14．88g／L，提高 38．8 ． 关键词 ：7-聚谷氨酸 ；复合诱变 ；发酵 ；正交设计 中图分类号：Q815 文献标志码 ：A 文章编号：1003—4978(2010)o2一O179一O6 High Production StrainBreedingforY—Polyglutam icAcid andItsFermentationConditionsOptimization DU Pei．YAN Zheng CHEN Shuang—xi (InstituteofB幻Pg PPr g，CollegeofLifeScience，HenanUniversity，HenanKaifeng475004，China) Abstract：BacillussubtilisHD-23wasusedasoriginalstrainfor PGA production，whichwastreatedwithmulti— mutagenicitymethodofultraviolet，diethylsulfateandnitrosoguanidine．BacillussubtilisHD~F9wasisolated，and the7-PGA yieldattained10．72g／I increasingby56．3 ，andthemutantshowedgeneticstabilityduring 10 generations．Thefermentation medium optimized byorthogonalexperimentwasglucose50g／I，yeastextract 8g／I，monosodium glutamate40g／I．In250mIshakeflask，theoptimalmedium volume，temperature，original pH ，rotationspeedwere40mI，37℃ ，pH 7．5and200r／min．Thefinal 一PGA yieldattained 14．88g／I increasingby38．8 ． Keywords：7一polyglutam ieacid；multi—mutagenicity；fermentation；orthogonalexperiment 7一聚谷氨酸 (一polyglutamicacid，7一PGA)，是由L一谷氨酸和 I)I谷氨酸单体之间通过 Q一氨基和 7一羧基形 成肽键之后生成的同聚酰胺 ，分子质量一般在 1O万～100万 Ul1]，具有增稠 、乳化 、凝胶、成膜 、保湿和粘接等 功能特性 ，可广泛用于医药制造 、食品加工、重金属吸附、化妆品生产 、植物种子保护等许多领域，是一种有极 大开发价值和前景的高分子生物制品 ]． 一 PGA 的化学结构独特 ，很