球虫卵囊的分子生物学研究进展.pdfVIP

178 ． 中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2005年 6月第 23卷第 3期 ChinJParasitolParasitDis June2005，Vol·23，No·3 ． 文章编号 2005)一03—0178—04 【综述 】 球虫卵囊的分子生物学研究进展 李凯，周本江综述 ，杨照青 审校 中图分类号：R382．32 文献标识码 ：A 卵囊 (OOcyst) 是 球 虫 『指 艾 美 球 虫 亚 目 种 ，一个血清型 但根据不同地域 、不同宿主 ，其毒 fEimeriina)的种类]在有性生殖过程中产生的，通常 力大小有所不同，生活史各期发育时间长短的差异 随粪便排出体外 ，含有子孢子的卵囊具有感染性 ，引 等，将其分为许多不同的虫株。Bartova等 用聚合酶 起家畜、家禽 、野生动物和人体的球虫病。形态学方 链 反应连接 的限制 性片段 长度 多态性技 术 (PCR— 法是虫种鉴定和病原学诊断的常用方法 ，但在样本量 RFLP)对刚地 弓形虫 4个分离株卵囊 DNA的ROP1 大 、卵囊数量少的情况下其具有检出率低 、费时费力 基因进行扩增 ，并用限制性 内切核酸酶 Dde1分析其 等缺点。分子生物学和基因诊断学在理论和技术上的 扩增产物 ，其中两株表现为 “无毒力株”。Schwab等 ： 发展为虫种鉴定和病原学诊断提供了有用的工具。本 用PCR扩增和检测出水 中少于 50个刚地 弓形虫卵囊 文综述了近年来分子生物学在通过卵囊对球虫进行虫 的核酸 ，为评估地表水被 弓形虫卵囊污染的情况提供 种鉴定和球虫病诊断中的研究进展。 了科学依据。Arkush等 用实时荧光定量PCR(Taq— ManPCR)扩增刚地 弓形虫卯囊特异的核糖体小亚基 1 肉孢子虫属 (Sarcocystis1 RNA(smallsubunitribosomalRNA，ssrRNA，SSUrRNA， 至今已命名的肉孢子虫约 130种．它们广泛寄生 18SrRNA)，以检测海水中蚌类携带卵囊的情况 ，分 在爬行类 、鸟类 、哺乳类 (包括人类)等动物。鱼类也 析蚌类对海生哺乳动物感染 弓形虫卯囊所起的作用。 寄生有少数的肉孢子虫。由肉孢子虫所致的疾病称肉 孢子虫病 (sarcocystosis)。现知，人可作为人肉孢子虫 3 新孢虫属 (Neospora) (S．hominis)和猪人肉孢子虫 (S．suihominis)的终宿主， 犬新孢虫 (Ⅳ．caninum)是世界范围内引起黄牛腹 也可作为一些尚未鉴定的肉孢子虫的偶然性中间宿主 泻的主要病原。黄牛通过食人外界环境 中的卯囊或经 肉孢子虫有 号性的被捕食一捕食二宿主生活史 垂直传播而感染。先前犬新孢虫的生活史不明，通过 中间宿主一般是食草动物或被捕食动物，它们吞食了 生物鉴定和 PCR法对犬粪中卯囊 DNA进行分析．首 随终宿主粪便排出的孢子囊 (sporocyst)或卵囊而被感 次分离并鉴定出犬新孢虫．从而证明犬为犬新孢虫的 染。无性期在中间宿主体 内形成包囊(cyst)，有关包囊 自然终宿主 。随后 ，用特异性引物的PCR法也在犬 的分子生物学研究已相当多 ，国内杨照青等 (20001 粪中检测到犬新孢虫卵囊 ，并证实此球 虫可经粪一口 也做了此方面的综述 ，而有关卵囊的研究报道较少 。 循环在犬与牛之间传播。类似的方法已用于观察 自然 Elsheikha等 1一用随机扩增多态性 DNA(RAPD)技术和 感染的猎狗卵囊排放情况。 限制性内切核酸酶消化法鉴定从负鼠(opossum，Didel—