真菌检验新技术新进展.pdfVIP

口岸卫生控制 第16卷 第2期 真菌检验新技术新进展 王 湘 天津市海河医院(天津，300350) 中图分类号 R446 文献标识码 B doi 10．3969／j．issn．1008—5777．2011．02．018 真菌按形态学可分为两大类：酵母菌、霉菌／丝 (MCDMI)，放大倍数可达30000倍，分辨率为0．151xm， 状真菌，而酵母菌根据菌落特征又有酵母型和类酵 采取相差、暗视野活体观察病原体，在显微镜下或荧 母型 (酵母样)的区分。尚有一类真菌常因寄生环境 屏上直接观看，拓宽了检查者的视野，可清楚地看到 及培养条件 (温度及营养)的不同而呈现酵母型或 真菌菌丝及孢子，不受分泌物中的粘液丝、白细胞、脓 霉菌型菌落，称为双相型真菌 j。真菌通常为非致病 细胞、上皮细胞的影响，提高了真菌的检出率。 菌，当机体免疫力降低、体 内微生态失衡时，外源性 镜检法快速、简便、实用，阳性结果可确定真菌 真菌侵人或内源性真菌大量繁殖而致病。近年来，由 感染。但阳性率较低，阴性结果不能做排除诊断，与 于激素、免疫抑制剂及广谱抗生素的广泛应用、器官 培养法检查结合起来才能更好地为临床服务；且该 移植、各种导管介人性治疗的深入开展，以及艾滋病 法不适用于血液的真菌检验。 人的不断增加，原发性、继发性免疫功能低下人群扩 1．2 培养检查法 ‘ 大，各种条件致病性真菌感染呈上升趋势，严重影响 包括大培养和小培养两大类，大培养：适用于血 患者的健康 ，已引起医学界的广泛重视 。器官移植 液、骨髓、CSF、胸腹水等无菌部位的体液增菌培养； 受者和恶性肿瘤患者中真菌感染的患病率高达20％ 小培养：适用于痰、脓液、组织、粪便、毛发，口、咽、 ～ 40％，而且往往是致命的感染，真菌感染已成为艾 耳、阴道等部位的标本。黄洁霞等报导 J，使用法国 滋病患者的主要死亡原因；在高度免疫抑制的病人 科玛嘉 (CHROMager)显色培养基检测念珠菌，与 中，由罕见的致病真菌引发的感染概率越来越高，且 传统的沙保弱培养基培养相 比，分离酵母样真菌的 多为致病真菌的混合感染，诊断异常困难 。因此， 阳性率相同，对细菌的抑菌率强，检测时间短，可检 如何提高真菌病 的诊断水平已成为国内外临床工作 测到念珠菌的混合感染。 者们共同关心的热点问题，临床实验室在真菌病 的 在对培养物的鉴定方面，也存在不够规范的问 诊断和治疗 中发挥着越来越重要的作用 。 题，临床与实验室之问、实验室与实验室之间缺乏交 1 基本检验技术 流，对结果难以做出正确判断。很多实验程序不够统 1．1 直接镜检法 一 ， 缺乏质量控制和标准化。甚至有轻视形态学、片 包括湿片镜检和干片镜检两大类，湿片检验 ：即 面追求一些不切实际的 “新技术”，不愿做深入细致 应用10％KoH透明后经棉蓝湿染，墨汁复染；干片检 的形态学观察的倾 向，这些问题如果不加以改进 ，势 验 ：包括革兰氏染色、吖啶橙荧光染色、病理组织苏木 必将限制临床真菌学的发展 。 紫伊红染色、巴氏染色、姬姆萨染色及1％甲苯氨蓝染 2 血清学诊断方法 色、Gridly染色、Mayer染色及荧光抗体染色。湿片镜 临床上可 自血、尿或感染组织液 中检查出真菌 检适用于皮屑、指(趾)甲、毛发等组织标本，可观察到 抗原 ，成为快速诊断真菌感染的重要手段之一。 菌丝、孢子等特殊结构，并可初步诊断某些丝状真菌