碱性纤维素酶产生菌的筛选及产酶条件的研究.pdfVIP

安徽农业科学。JournalofAnhuiAgri．Sci．2010，38(17)：8844—8846 责任编辑 马树梅 责任校对 卢瑶 碱性纤维素酶产生菌的筛选及产酶条件的研究 陈亚平 ，王白娟 ，刘鲁峰 ，彭谦 ，赖泳红 (1．云南农业大学，云南昆明650201；2．云南大学微生物研究所，云南昆明650091) 摘要 [目的]筛选碱性纤维素酶产生菌，并优化其产酶条件。[方法]对从土壤样品中分离到的100余株茵进行平板筛选，获得 1株产 碱性纤维素酶的菌株ZJJ．1，并对其进行液体培养基成分及发酵产酶条件优化。[结果]培养基最佳配方为：麸皮0．5％，大豆粉2％， KH，PO0．2％，NaC10．7％；最优产酶条件为：37℃、175r／rain培养48h，初始 pH值为7。在此条件下，最高酶活水平达51．20U／ml。 [结论]为碱性纤维素酶的后续研究提供 了优 良的菌种资源。 关键词 筛选；碱性纤维素酶；培养奈件；酶活水平 中图分类号 Q814 文献标识码 A 文章编号 0517—661l(2010)17—08844一O3 Research OilScreeningofBacteriaStrains chProducingAlkalineCellulOes andOptimization oftheCultivationConditions CI狐NYa-pingetal (YunnanAgnculturalUniversity，Kunming，Yunnan650201) Abstract 『0bjective]l1heaimwastoscreenbacteriastrainswhichproducingalkalinecelluloseandoptimizethecultivationconditionsforen— zymeproduction．M『ethod1AstrainofalkalinecellulaseZJJ．1wasisolatedbyfiatscreenwith100bacteriastrainswhichisolatedfromsoil，and thencompositionofliquidmediumandthefermentationconditionwereoptimized．IResultlTheoptimumcomponentsofliquidmediumsconsisted ofbran0．5％ ，soybeanmeal2％ 。KH，PO 0．2％ ，NaCl0．7％ ；andtheoptimum conditionwasdescribedasfolloWS：pH 7．0，at175r／minfora- bout48hours．Inthiscondition，theactivitiyofCMCasecouldreachto51．20tJ／m1．1ConlusionlThisstudyprovidedexcellentstrainresources forfurtherstudyofalkalinecellulose． Keywords Screen；Alkalinecellulase：Cultivatonconditions；TheactivitiyofCMCase 碱性纤维素酶是纤维素酶系的1个组分，即羧甲基纤维 1．3 方法 素酶 ，它只具有内切 B—l，4-葡聚糖苷酶(又称 CMC酶)活性， 1．3．1 菌种筛选 。采用 CMC—Na碱性平板进行菌种粗筛， 在对天然纤维素(棉纤维)的作用过程 中不能发生酶组分间 能产生纤维素酶的菌落周围产生水解圈，圈的大小反映了产 的协同效应，主要对棉纤维中占10％左右的非结晶区的纤维 酶能力的强弱 J，然后挑选水解圈大的作为粗筛菌种。 素分子起作用，而对结晶区纤维素水解活力很低，这样棉麻 1．3．2 碱性纤维素酶活力的测定 J。发酵液经7000r／min 织物的强度和表观聚合度均不会发生显著改变。将碱性纤 离心15min得到粗酶液。碱性纤维素酶活力测定在 pH值 维素酶添加到洗涤剂中不仅可以增强洗涤效果 ，而且对衣物 9．5的甘氨酸一氢氧化钠缓冲液中进行。取粗酶液0．5Tnl， 还具有柔软、增艳的作用，因此碱性纤维素酶广泛应用于洗 与 1ml