细胞分离纯化技术研究进展.pdfVIP

( ) ·6 · 生物学教学 2008年 第 33 卷 第 9 期 细胞分离纯化技术研究进展 李红涛 　(江苏食品职业技术学院　淮安 　223003) 摘 　要 　对细胞进行分离纯化的目的是为了获得较高纯度和活力的细胞以便用于实验研究或临床移植 。分离纯化细胞的方法很 多 ,通过对细胞表面标记可以用吸附、荧光活化细胞拣选 、磁活化细胞分选等技术分离细胞 ;也可应用无表面标记的方法 ,如离心、 离心淘洗 、自由流细胞电泳等技术来纯化细胞 。本文就 目前这些分离纯化细胞的方法作一介绍 。 关键词 　细胞分离纯化 　离心　电泳 　磁活化 　荧光活化 　　一般来说 ,在进行细胞分离时 ,直接用酶法或非酶 性 ,从而可利用其选择性黏着特性而使之粘附于一定 ( ) 方法从器官、组织游离下来的多是数种细胞的混合物 。 的固体 塑料或玻璃 表面 , 以达到与非黏着性细胞分 为了从细胞水平研究生物体的结构 、组成 、代谢等生物 离的目的。 学问题 ,往往需要从器官、组织中分离得到大量的同种 1. 2 　荧光活化细胞拣选技术 　荧光活化细胞筛选 ( ) 细胞 ,而且要求这些细胞要有较高的纯度和活力 。更 fluore scence activated cell sorting, FACS 的原理是 :制 为特别的是 ,如果要进行细胞功能方面的研究 ,或者要 备细胞悬液后 ,将偶联了荧光染料的特异性抗体标记 获取用于临床移植或生物工艺产品的细胞时 ,必须在 在细胞表面 ,再经过流式细胞计数仪使细胞悬液以微 ( ) 研究、移植和工艺化之前将所需的特定细胞从其 自然 滴 每滴至多含有一个细胞 细流的形式通过激光束 , 环境中分离纯化出来 。所以,细胞的分离和纯化是现 带荧光标记的细胞获得的电荷与不带荧光标记细胞的 代生物学研究经常涉及的问题 。 电荷不同,然后通过强大电场将带电不同的细胞分别 分离纯化细胞的过程依赖于细胞的生物学性能或 筛选到不同的容器从而达到高精度的分离 。目前 ,这 物理特性 ,能够用于细胞分离的典型生物性能有表面 套装置能够根据 3 ～5种参数进行细胞类型的识别 ,在 吸附、荧光结合染色和特异性表面抗体表达 ,而细胞的 有合适抗体和荧光染料的条件下每小时纯化的细胞可 7 [ 2 ] 密度 、大小和表面电荷则为物理学特性参数 。因而 ,据 达 1 ×10 个 ,分离纯度达 95%或更高 。所以, 虽然 此建立的细胞分离纯化方法也是多种多样的,本文对 FACS装置的价格昂贵 ,但是随着计算机功能的日趋完 此作一概述 。 善及新的荧光物质的不断发现 ,它已广泛应用于各个 1　通过表面标记纯化细胞