细胞融合技术研究进展.pdfVIP

维普资讯 安徽农业科学，JournalofAnhuiA ．CSi．2008，361【5)：6187—6188，6207 责任编辑 孙红忠 责任校对 马君叶 细胞融合技术研究进展 李保华 (河南师范大学生命科学学院，河南新乡453oo7) 摘要 人似对细胞融合的机理、融合方法的了解越来越多，其应用范围也越来越广。对细胞融合的机理、方法、应用及 目前存在的问题 进行 了综述 。 关键词 细胞融合；机理 ；方法；应用 中图分类号 Q813．2 文献标识码 A 文章编号 0517—6611(2008)15—06187—02 ResearchPI ssin0m ~USiOIITechnique U Bao-hua (CoHegeofLifeScience，Henna NormalUniversity，Xinxiang，Henna453(107) Abstract eimplication,regulationaad methodofcellfusionteehniquehavebeenlTlOreandmoleacknowledgedsince吐leoellfttsionisdiscovered．Its applicationdomainsaleincreasingwhiletherestillisavarietyofproblem tobesolvde ．Itsissuesweresummaride brialyandthepersonneladviceonits developmentandapplicationwasalos ponitde out． Keywords CeⅡfitsion；CeUengineeri~rg：Somatichybridization；Application 细胞融合不仅为细胞的起源、核质关系、肌肉骨骼胎盘 玉米 、哈加野豌豆与豌豆的融合_5J。此法 比病毒更易制备和 的发育llJ、肿瘤发生、干细胞介导的组织再生等理论领域的 控制，活性稳定，用 PEG作为病毒的替代物诱导细胞融合。 研究提供 了有力的手段_2j，而且被广泛应用于微生物学、育 在 PEG诱导细胞融合的有效浓度范围内(50％～55％)对细 种学、发生生物学，特别是在单克隆抗体l3J及动植物远缘 胞的毒性应进一步减小。 杂交育种方面具有重要意义。 2．3 物理法 1 细胞融合的机理 2．3．1 电脉冲诱导细胞融合技术。电脉冲诱导细胞融合技 最近研究表明，细胞融合与病毒和细胞之间的融合以及 术，产生于2O世纪80年代，目前已成为细胞融合的有效手段 细胞内的膜泡融合有许多相似之处，即带包被的病毒 (或细 之一。该技术融合效率高，是PEG的 100倍，操作简便、快 胞)通过转膜病毒蛋白介导与宿主细胞的细胞膜进行融合。 速 ，对细胞无毒无害，可在显微镜下观察融合全过程l6J。 I类病毒融合蛋 白包括流感病毒红血球凝集素 (H )和人类 2．3．2 激光融合技术。1987和 1989年德国海德堡理化研究 免疫缺陷病毒包被蛋 白，它们都具有相似的结构域，即都具 所采用准分子激光器使油菜原生质体融合，从开始照射到完 有 a-螺旋结构。病毒和细胞之间正是通过这些蛋 白来完成 成融合仅需几秒钟|7J。该法可选择任意两个细胞进行融合， 融合过程(伴随有构象的变化)的。细胞内的膜泡融合也是 易于实现特异性细胞融合，作用于细胞的应力小，定时定位 如此，其相关融合蛋 白包括 GTPases及 SNARE家族。因此推 性强，损伤小，参数易于控制，操作方便，可利用监控器清晰 测细胞融合采用相似的机理。然而细胞融合蛋 白并不全具 地观察整个融合过程，实验重复性好，无菌无毒性，但它只能 有 a-螺旋结构，提示 a一螺旋并非融合所必需_2J。 逐一处理细胞 。 2 细胞融合的方法 2．3．3 空间细