茶树中提纯总RNA的研究.pdfVIP

茶 　叶　科 　学 　2000 , 20 ( 1) : 27 —29 J ournal of Tea Science 文章编号 : 1000 - 369X (2000) 01 - 0027 - 03 茶树中提纯总 RNA 的研究 江昌俊 , 王朝霞 , 李叶云 (安徽农业大学农业部茶叶生物技术重点开放实验室 , 合肥 230036) 摘要 : 在克氏一步法分离总 RNA 的基础上 , 根据茶树叶片生化成分特点 , 做了部分修改 , 并研 究了不同浓度的L - 半胱氨酸和可溶性聚乙烯吡咯烷酮 (PVP) 、不溶性 PVP 对提取的 RNA 纯度 、 回收率和完整性的影响 。分光光度计检测和变性琼脂糖凝胶电泳结果证明: 使用本方法并加入 5 - 10 mmolL L - 半胱氨酸或 4 % - 6 %可溶性 PVP 能提高 RNA 纯度和 (或) 回收率 , 研磨时加入 5 % - 10 %不溶性 PVP 对提高 RNA 完整性有较好的效果 。 关键词 : 茶树 ; 总 RNA ; 分离纯化 ; PVP ; L - 半胱氨酸 中图分类号 : S5711 ; Q523 　　文献标识码 : B Studies on Isolation of General RNA from Tea Plant [ Camellia sinensis (L ) OKuntze ] J IAN G Changj un , WAN G Zhaoxia , L I Yeyun ( Key L aboratory of Tea B iotechnology , Ministry of Agriculture , A nhui Agricultural University , Hefei 230036) Abstract : Chomczynskis single step method of RNA isolation was partially modified on the basis of the features of biochemistry compositions in fresh tea leavesInfluence of different concentration of LCysteine , soluble polyvingl pyrrolidone (PVP) and insoluble PVP on isolated RNA purity , recovery rate and interity were studiedThe results of the spectrometeric determination and denaturing agarose gel electrophoresis showed that the purity andor recvovery of isolated RNA can be improved by adding 5 - 10 mmolL of LCysteine or 4 % - 6 % of soluble PVPThe integrity can be increased by adding 5 % - 10 % of insoluble PVP when crushing the leaves Key words : Tea plant ( Camellia sinensis) ; General RNA ; Isolation and purification ; PVP ; LCysteine 　　从茶树组织中提取纯度高 、完整性好的 心法 、