%81酯免疫检测Ⅰ.人工抗原的制备及表征.pdfVIP

第9 卷 第2 期 应 用 化 学 .UC= 9 )U= 2 ##3 年2 月 ! ! ! R(,)@5@ Y-+)6Z Q 6MMZ,@L R(@*,5W+[! ! ! 6GH= ##3 邻苯二甲酸二丁酯免疫检测 ! 人工抗原的制备及表征 ! ! ， ! # ! 张明翠 ! 庄惠生 ! 郎! 庆 ! （东华大学环境科学与工程学院! 上海###$%；安徽师范大学化学与材料科学学院! 芜湖） 摘! 要! 通过保留丁酯基结构和在芳环上引入氨基取代基合成了一种邻苯二甲酸二丁酯半抗原衍生物’氨 基邻苯二甲酸二丁酯，通过 % ( )*+、,+ 和-. 确证了结构，其中’硝基邻苯二甲酸二丁酯的 个紫外吸收峰 分别为： / % 01 ， / $2 01 ；’氨基邻苯二甲酸二丁酯的 个紫外吸收峰分别为： / 3 01 ， / !% ! !% ! 22 01 。半抗原衍生物通过重氮化反应与 456 偶联，得到人工抗原，经荧光光谱（ / 9#: 01 ， / ! ! 78 71 32 01 ）、体系颜色变化和免疫实验确证偶联成功，抗原结合比为%9; %，为进一步的抗体制备和免疫分析提供 可靠的免疫原。 关键词! 邻苯二甲酸二丁酯，人工抗原，半抗原，制备，表征 中图分类号：3$= $ ；$#! ! ! ! ! 文献标识码：6! ! ! ! ! 文章编号：%###’#$%2（##3 ）#2’#2$#’# 邻苯二甲酸二丁酯（L4M ）是一种主要的增塑剂和软化剂，用于塑料、橡胶以及化妆品、香料、印染、 涂料等行业。过去一直认为邻苯二甲酸酯类化合物毒性低且有良好的理化特性，而无限制地生产和使 用。而近年来研究发现邻苯二甲酸酯类物质对环境、生物与食品能造成污染［%， ］ ［9 ， ］ 。NC70EAEEAO 等 发现 邻苯二甲酸二丁酯对人上呼吸道黏膜细胞及淋巴细胞有遗传毒性，通过饮食、呼吸和皮肤等途径被人体 吸收，对雄性生殖系统造成危害。美国环保局（-5@M6 ）和世界野生动物基金会（PPQ ）均将L4M 列为 环境激素类物质［$ ，3 ］。 目前对邻苯二甲酸类环境激素的监测主要有气相色谱、液相色谱和气液联用等色谱技术［: ，2 ］，国内 外有关免疫分析方法监测邻苯二甲酸酯类环境激素的较少［? ，%# ］。免疫分析具有特异性强、灵敏度高、方 便快捷、分析容量大、检测成本低、安全可靠等优点可以满足简单、快速、灵敏检测环境激素的要 求［%%，% ］。邻苯二甲酸二丁酯为小分子化合物，仅有反应原性而缺乏免疫原性。如何得到保留其抗原决 定簇的人工抗原是实现免疫分析的关键步骤之一。本研究以 ’硝基邻苯二甲酸为原料，经过酯化、还原 和与456 偶联反应等一系列步骤，合成邻苯二甲酸二丁酯人工抗