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image J 软件分析双标及多标格免疫荧光共表达操作步骤 1. 从image J 官方网站下载该软件，切记一些重要的相关的插件要一并下载，如colocalization-finder 插件等，存在 在安装目录下，否则，有些功能无法找到。 2.将要分析的图片文件打开，出现如下画面时，将一些勾勾去掉，这样的话，一张含有多通道的免疫荧光源图片只 以一张图片出现，而不会出现每一种荧光分别就会有一张图片，这对后面选取目的区域是非常有利和方便的。注意： 需要先将图片转换为TIFF 格式，否则好像不能用于分析。 3. 打开图片后，将图片转换为8-或者16-bit。 4. 为了便于分析和观看，可以在image 根据栏里选择rotate 旋转图片，图中我把图片逆向旋转了90 度，见下下图。 6. 将选定的区域复制到一个新的文档中。步骤：edit,copy-dile,new,internal clipboard。即得到一张某一激发波长下的 蛋白免疫荧光图,默认显示为clipboard. 7. 将鼠标放在原图片上，并且轻轻转动滑轮，原图片画面即显示第二个激发波长下的图片，见左上角有 C:2/3，即 表示是 3 中荧光通道中的第二个荧光通道图片，同样将选定的区域复制到一个新的文档中。步骤： edit,copy-dile,new,internal clipboard。即得到第二张某一激发波长下的蛋白免疫荧光图，默认显示为clipboard -1. 8. 同样将鼠标放在原图片上，并且轻轻转动滑轮，原图片画面即显示第三个激发波长下的图片，见左上角有C:3/3， 即表示是 3 中荧光通道中的第三个荧光通道图片，同样将选定的区域复制到一个新的文档中。步骤： edit,copy-dile,new,internal clipboard。即得到第三张某一激发波长下的蛋白免疫荧光图，默认显示为clipboard -2.