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R2M核酸分子杂交仪.doc
R2M核酸分子杂交仪
一、外观
二、原理
应用了“导流杂交”设计原理:将探针固定于膜纤维中,使目标分子主动导流
穿过固定有探针的薄膜并与互补探针相结合,形成复合物而被固定下来;而未被结合
固定的分子穿过薄膜后被除去。因此,它加速了互补分子之间的相互作用,将杂交
时间从几个小时降低至几分钟,是低密度医用基因芯片工作平台,比传统杂交法省时
几百倍、更精确,灵敏。此技术更获得了两项美国专利技术(专利号5741647、602-
01-87)。
(注:探针 同源DNA 非同源DNA 膜 结合探针的DNA)
DNA 单链分子在流经探针分子附近时,与同源探针结合,不同源者由溶液带离膜。
三、优势
1、反应时间快:
相对于传统杂交法数小时或者整天的时间,导流杂交法只需要十数分钟便可完成;
2、灵敏度高;
3、适用范围广,拥有多种配件,可以满足不同实验的需要;
4、高通量,消耗试剂少,最大限度的节约成本;
5、操作简单,可程序化控制实验条件,如温度、泵率。
四、主要应用
1、HPV检测的重要平台:R2M核酸分子杂交仪配套相关试剂盒使用,可精确检测出
33种HPV(人乳头状瘤病毒)常见基因型别(包括17种高危、16种低危型),同时也
可作为HPV病毒的筛查,能快速准确诊断妇女宫颈细胞样本中HPV病毒DNA的存在。
是HPV DNA检测的重要平台。
导流杂交及HPV筛查、分型结果示意图
2、适合任何导流杂交法的分子诊断:R2M核酸分子杂交仪可广泛用于利用分子导
流杂交的DNA分子诊断。还可以用于包括核酸在内,其他任何合适的能固定靶分子
的导流杂交方法的分子诊断,包括抗原-抗体、酶-底物和受体-配体等。
蛋白质低密度芯片(细胞因子)
3、可拓展应用于常规分子生物学转印实验及高通量菌种的筛选:
如Southern-Blotting、Northern Blotting、Western-Blotting 、菌落杂交的检
测等。并具有以下优点:
背景更低,反应特异性更好;
不同规格的支架可以满足不同转印膜的需要;
方便的抗体回收装置,让抗体可以反复使用。
常规分子蛋白印迹(Western-Blotting)实验方案:
背景更低:能实现信号高通量值,背景低,灵敏度强的效果;
特异性强:使用0.5%脱脂奶粉和10%的BSA就可达到良好的封闭效果;
反应时间更快:传统4~22)h,现仅需22~45)min;
对膜的兼容性好:对PVDF膜(聚偏氟乙烯膜)和NC膜(硝酸纤维素膜)都能
应用于westernblotting与传统实验所需时间比较
反应步骤 比较内容 传统western~blotting R2M核酸分子杂交仪 封闭 反应时间 (1~10)h 1min 试剂浓度 5%脱脂牛奶 0.5%脱脂牛奶 反应方式 扩散 导流 洗涤(3×) 反应时间 (3×10)min (3×40)s 一抗反应 反应时间 (1~10)h 10min 试剂浓度 1× 1× 反应方式 扩散 导流 洗涤(3×) 反应时间 (3×10)min (3×40)s 二抗反应 反应时间 1h 10min 试剂浓度 1× 1× 反应方式 扩散 导流 洗涤(3×) 反应时间 (3×10)min (3×40)s 显影 反应时间 (1~30)min (1~30)min 合计 反应时间 (4~22)h (24~54)min
低浓度封闭液(5%BSA、0.5%NFDM)的实验效果图
NC膜的实验效果图 PVDF膜的实验效果图
核酸分子杂交仪的使用性能和基本参数
产品型号规格:R2M
技术参数
反应室温度控制 20 ℃-70 ℃ 温度显示分辨率 0.1 ℃ 温度精度 ±1.0 ℃ 输入电压范围 AC 115-230V,50-60Hz 配套电源 输入-220V/50Hz 输出=12±0.5)V 输出功率 150W 升温速率 6-10 ℃/min 降温速率 2-4 ℃/min 噪 音 ≤62db(A加权) 蠕动泵抽液速度 高压泵(240-270)mL/min
中压泵(190-230)mL/min
低压泵(160-190)mL/min 3. 操作模式
1)手动模式:直接输入所需温度,时间并运行。
2)程序模式:最多可设定100个程序,每个程序可单独保存、读取、修改、运行。
4、标准和认证
通过了国内外电气安全性能相关标准认证。通过的检测标准和认证包括:
1)国家标准《GB 4793.1-2007测量控制和实验室用电气设备的安全要求第1部
分:通用要求》
2)国家标准《G
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