肿瘤相关基因.pptVIP

研究生讲义 全球恶性肿瘤的流行状况 2000年世界癌症发病1,006万人，死亡621万人，现患2241万人。发病与死亡比10年前增长约22%。 恶性肿瘤流行特征 （一）时间趋势 （二） 地区分布 （三） 人群分布 北美、北欧、西欧、大洋洲 — 结肠直肠、乳腺、前列腺 例外：大洋洲以黑色素瘤为主 中欧、南欧 — 胃癌、膀胱癌 亚洲东部(含日本、中国) — 胃、食道、肝脏 — 发达地区：肺、结肠直肠、乳腺 — 欠发达地区：分布模式不清晰 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　 癌基因及其产物的检测方法　　检测癌基因及其产物的标本可以是实体瘤和体液，前者需要提取DNA或RNA进行检 测，或经过组织切片以免疫组化方法检测基因表达产物，或者采用血尿标本，用 ELISA等法检测癌基因蛋白，几种主要检测方法介绍如下. (一)Southern杂交法 (二)原位杂交 (三)酶联免疫吸附试验 (四)免疫组化染色（五)PCR技术 (六)PCR相关技术 1.PCR-RFLP技术:PCR-RFLP全称多聚酶链反应(PCR)一限制性片段长度多态性 (restriction fragment length Polymorphism，RFLP)分析.PCR-RFLP主要有2个环 节:(1)靶基因PCR扩增;(2)扩增的DNA片段限制性酶切图谱(长度多态性). PCR -RFLP主要用于核酸变异性分析与比较。 2、PCR-SSCP技术:PCR-SSCP是聚合酶链反应一单链构象多态性分(single strand conformation polymorphism)的简称，原理是将经扩增的DNA片段经过变性处 理，形成单链，由于序列不同，单链构象就有差异在中性聚丙烯酰胺凝胶中电泳的迁 移率不同，通过与标准物的对比，即可检测出有无突变. 　　PCR-SSCP分析法己广泛应用于检测各种病原体基因的点突变及缺失 突变，基因的多态性分析等.。 　3.PCR-southern blot: 或Dot blot技术是将PCR扩增产物转移到硝酸纤维膜或尼 龙膜上，再与标记的特异性探针进行杂交，然后放射自显影，来检测有无特定的扩增 片段及相对含量，现己广泛应用于癌基因:遗传特异基因，病 原体特异基因等方面的研究及检测 （五）原癌基因的甲基化程度降低而激活 DNA分子中的甲基化对于保持双螺旋结构的稳定， 阻抑基因的转录具有重要作用。 结肠癌和小细胞肺癌细胞中c-ras基因甲基化水平降低  （二）癌基因与肿瘤发生 1、ras基因变异与肿瘤发生 常见变异：12、13、61位密码子点突变。 变异Ras蛋白的作用：水解GTP能力降低，促进细胞生长。 相关肿瘤：结肠和直肠癌。 2、myc基因变异与肿瘤发生 常见变异：8号染色体与14号染色体与易位;基因扩增。 常见相关肿瘤：Burkitt淋巴瘤，小细胞肺癌等。 3、neu（c-erbB-2）基因变异与肿瘤发生 化学致癌物诱导神经胶质瘤提取 常见变异：点突变；基因扩增；过表达。 常见相关肿瘤：多种。(30﹪) 4、bcl-2基因与肿瘤发生 25kD,抑制细胞凋亡 常见变异：易位(14q和18q)。 常见相关肿瘤：结节非霍奇金淋巴瘤。 5、mdm2基因变异与肿瘤发生 491氨基酸的具有锌指结构的蛋白质，Mdm2与P53和RB蛋白结合，使其失活。 常见变异：多种因素影响，紫外线诱导其高表达 。 常见相关肿瘤：多种。 第二节 抑癌基因 一、概念 抑癌基因（tumor suppressor gene）又称为抗癌基因（antioncogene）是一类在正常情况下对细胞增殖有负调控作用，而在两个等位基因都缺失或失活时可促进肿瘤形成的基因。 基因名称 RB p53 APC BRCA DCC P16 NF1 PTEN VHL 13q14 17p13 5q21 17q21 18q21.3 9p21 17q11 10q23.3 3P25 染色体定位 二、常见的抑癌基因 相关肿瘤 视网膜细胞瘤 细胞核 结肠癌 乳腺癌、皮肤癌 结、直肠癌 多种肿瘤 神经纤维瘤病 胶质母细胞瘤 肾癌、嗜铬细胞瘤 （三）抑癌基因表达的产物 1、跨膜受体 2、胞质调节因子或结构蛋白 3、转录因子和转录调节因子 4、细胞周期因子 5、DNA损伤修复因子 6、其他功能蛋白