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单胃动物内脏组织蛋白质代谢研究方法 罗钧秋余冰陈代文‘ (四川农业大学动物营养研究所，雅安625014) 早期传统蛋白质理论认为，动物对蛋白质需要即是对氨基酸的需要，氨基酸代谢一直是蛋白质营 养研究的重点。氨基酸在脏器组织内的代谢动力学研究不仪能体现日粮蛋白自身的营养价值特性，还 能反映蛋白饲料对动物机体产生的局部生物效应。由于这种生物学机制涉及到细胞蛋白质生物合成及 机体氮代澍池等微观效应，可见，方法学问题导致测定结果的准确性和精确性将决定机体的营养健康 状况。鉴于此，本文就有关氨基酸在内脏组织(消化道和肝脏)的代谢动力学理论及研究方法作一 简要综述，旨在为评定蛋白饲料生物价值提供有力的研究手段。 1氨基酸在动物内脏组织的代谢规律研究 为了研究氨基酸在动物内脏组织的代谢规律，基于最早提出的内脏器官氨基酸平衡理论．需要测 定各内脏组织的血流速度和取得血液样品(动脉血和静脉血)中的氨基酸浓度。对消化道而言，需 测定门静脉血流速度；对肝脏而言，需测定肝静脉血流速度。研究表明，AA在内脏组织代谢具有细 胞形态学特征。肠道上皮细胞摄取氨基酸的来源取决于上皮细胞的分化程度。由于隐窝细胞主要来源 于动脉营养，而肠绒毛细胞主要来源于肠腔营养，因此静脉标记AA分布于隐窝细胞的丰度高于肠上 皮细胞…。肝脏门脉附近实质细胞摄取门脉氨合成尿素，而肝静脉附近实质细胞分解过量尿素生 成GlII[”。 2消化道氨基酸代谢 消化道不仅是营养物质消化吸收的主要器官，而且是营养物质代谢的重要器官。近20年研究表 造成这一现象可能存在三种原因：1)蛋白经消化酶分解成小寡肽进入门脉循环。肠细胞刷状缘存在 时来源于日粮蛋白降解和肠系膜动脉氨基酸，因此门脉氨基酸净流量低估了实际进入门静脉的氨基酸 量。3)大量日粮从在小肠黏膜细胞内参与代谢。一些氨基酸(氨酰胺、谷氨酸和天冬氨酸)经氧 化分解，为肠道提供主要能源，一些氨基酸参与肠黏膜及分泌蛋白的合成，并通过脱氨基和转氨基作 用转变成其他非必需氨基酸，从而对进入门静脉的氨基酸模式进行有选择的修饰。 肠道AA代谢改变进人门脉循环的氨基酸数量和模式”…。大量研究结果显示，日粮氨基酸约l／3 在仔猪肠道代谢，进人门脉循环的必需氨基酸占摄入量的56％，而用于肠黏膜蛋白合成的氨基酸仅 为肠道代谢量的18％。可见日粮氨基酸在肠道代谢以分解代谢为主，肠道必需氨基酸代谢对外周组 织生长的影响主要取决于氨基酸经肠道氧化的程度。相比丽言，丙氨酸、酪氨酸、精氨酸的门脉氨基 ·四川省十一五重大专项课题——饲料生物技术的研究内容。 通讯作者：胨代文。ch∞d忱@8me血cn。 ·478· 分子营养与新技术研究 酸净流量分别为相应食人量的205％、167％和137％…o。若提高日粮蛋白质含量，研究肠道氨基酸 代谢的适应性，表明苏氨酸经肠道的存留量在高日粮蛋白下为低日粮蛋白的84％，肠道苏氨酸的 80％将被肠道利用“”。由于这部分苏氨酸大部分用于黏膜蛋白质合成，当机体处于吸收后状态时， 黏膜蛋白降解成氨基酸进入门脉供肠外组织利用“…。 2．1门静脉从浓度与前腔静脉“浓度之差反映肠道对日粮从的吸收速率 该方法是应用较早的研究消化道氨基酸代谢的方法。其测定原理是：门静脉和前腔静脉AA浓度 变化量=(肠道AA吸收量+从血液中摄取的从量+肠外其他组织释放入血的AA量)。因此，门静 脉AA浓度与前腔静脉AA浓度之差反映肠道从吸收量。研究表明，在不同蛋白日粮中添加寡肽引 起不同的生产性能，其作用机理在于：与劣质蛋白相比，寡肽添加于优质蛋白中，采食后前期，寡肽 AA残基和日粮其余AA吸收量高”“。在各组日粮AA含量相同情况下，AA吸收量的大小即可反映 AA吸收速率。该方法没有对门静脉血流量进行测定，但若各日粮组存在近似的门静脉血流量，则该 试验结果合理可靠。 2．2消化道氨基酸代谢的净门静脉平衡技术测定 Dmined 门静脉回流内脏组织(P0rtal Viscem，PDV)包括胃、脾、胰、小肠和大肠以及消化道脂 35％。门静脉是PDv的静脉血管，担负着从消化道中获取氮源供肠外组织利用的功能。门静脉氨基 酸平衡是指由动脉和肠腔进入门静脉回流内脏组织的氨基酸数量与进人门静脉氨基酸数量之差，通常 以占日粮摄入氨基酸量或占肠腔净吸收量的比例表示。因此，