莪术油对乳腺癌癌前病变大鼠细胞增殖与凋亡因子表达的干预研究.pdfVIP

莪术油对乳腺癌癌前病变大鼠细胞增殖和凋亡因子表达的干预研究1 宋爱莉，李静蔚，时光喜 山东中医药大学附属医院乳腺外科，山东济南，250014 乳腺癌前病变即非典型增生阶段发生浸润性癌的风险明显升高n1，如何早期干预，阻断 或逆转浸润性癌的发生，是降低乳腺癌发生率的关键。中药莪术提取物莪术油，含莪术醇、 D一榄香烯、莪术酮等多种成分，对于乳腺癌、肝癌等多种恶性肿瘤具有多靶点抗肿瘤作用乜1。 增殖细胞核内抗原Ki67fl》．够确切的反映肿瘤细胞增殖活性，与乳腺癌的发展及预后相关D1。 无论肿瘤的发生、发展、还是治疗及预后，均与细胞增殖与凋亡有密切关系n1。目前对细胞 制凋亡的发生中起重要作用。本研究通过检测不同干预条件下DMBA诱导大鼠乳腺癌前病变造 胞增殖活性的影响及干预作用。 1糖精与麦法 1．1实验动物及材料 动物：6周龄健康、未育sD系雌性大972只，清洁级。 试剂：即用型SABC试剂盒、DAB-氨基联苯胺显色试剂盒、二抗试剂盒购自上海长岛生物 药品：二甲基苯葸(Sigma公司生产，产品编号165023)，59／支，按1Omg：lml比例溶于 三苯氧胺(枸橼酸他莫昔芬片，lOmg*60片／瓶，江苏扬子江药业集团有限公司，国药准字 ，按10mg：50ml比例溶于生理盐水，备用。 1．2实验方法 1教育部博七点幕金资助(20040441025)、国家自然科学基金资助 通讯作者：宋爱莉，(1952--)，女，汉族，山东威海人，教授、主任医师、博卜生导师，主要从事中医外科和乳腺外科的 188095 中医及中两医结合Il笛床、教学及科研T作。通讯地址：济南市文化两路42号，邮编25001l。Tel：13793 E·mail：songaili218@126．corn 各治疗组第2天开始用药4周，常规饲养lo周后取大鼠乳腺组织。实验共14N。 灌胃4周。 1．3免疫组化操作方法及评定方法 阳性细胞在胞浆、胞核、胞膜表达棕黄色颗粒。每一切片在x200倍光学显微镜下选择阳 内，在相同的背底和倍体条件下选择相应的参数，进行计算机完全定量分析。图像处理分析 系统软件由武汉同济医科大学千屏影像工程公司提供。 阳性细胞阳性率=阳性目标面密度÷(阳性目标面密度+阴性目标面密度) 1．4统计方法 方差分析或t检验，应用SPSS统计软件。 2．实验结果 2．1大鼠乳腺组织病理形态学表现 至实验结束大鼠存活情况为空白组10P,、病模组11只、莪术油组1 1只、 O只、康莱特组1 TAM组10只，共52只。 大鼠乳腺组织病理形态结果显示，空白组与疾病模型组比较，结构比存在明显差异，后 者出现癌前病变比例明显高于空白组(P0．01)。治疗组与疾病模型组比较，一般增生比例增 高(P0．05)，三苯氧胺组癌前病变百分比低(P0．05)，其他无明显差异。 表1大鼠乳腺组织病理形态分布表 65 j}参PO．01；与莪术油组比较，AP0．05。 2．2各试验组中，大鼠不同类型乳腺组织中Ki67表达的阳性细胞阳性率 ·与普通增生相比，p0．05；△与造模对照组相比，p0．05。 2．3大鼠乳腺组织Fas、FasL和bcl-2的蛋白表达情况 疗组比较，康莱特组的Fas蛋白表达的细胞阳性率偏低(P0．05)，其他无明显差异． 大鼠乳腺组织Fas、FasL和bcl-2的蛋白表达情况表 与莪术油组比较，△P0．05，△△P0．01。 3讨论 l 上世纪70年代提出的Wel 位一一增生开放的小叶一一普通增生一一非典型增生一一原位癌一一浸润性癌一一转移癌的 组织学连续谱系。WH02003乳腺肿瘤组织学分类明确的将非典型增生归属为乳腺癌前驱病变。 66