NADPH氧化酶源性活性氧在糖尿病和其血管并发症发生中的作用机制.pdfVIP

562 ISSN1007-3949ChinJ 7，2009 Arterioscler，Vol17，No ·专题报告· NADPH氧化酶源性活性氧在糖尿病及 其血管并发症发生中的作用机制 黎健。高丹。李兰芳，原慧萍，李淼。张小勇 (卫生部北京老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室，北京市100730) [关键词]糖尿病；血管病发症；活性氧 2型糖尿病的发病机制为胰岛素抵抗和胰岛素分泌受 一步应用Westernblot分析NOX亚组分的表达变化，结果表 损。必威体育精装版的研究结果显示，氧化应激在糖尿病及其并发症的 发病机制中起重要作用。在高游离脂肪酸(FFA)条件下，由p47phox和Rae．1的表达在0．25mmol／L棕榈酸处理后显著 于活性氧(ROS)产生过多引起的氧化应激可造成胰岛素抵升高，p22phox则无显著改变。观察棕榈酸对NOX3活性的 抗和胰岛B细胞功能丧失，导致糖尿病的发生，而血糖升高 调节机制，结果表明，在0．25mmoVL棕榈酸作用下，HepG2 进一步加重氧化应激，引发大血管和微血管病变，产生糖尿 细胞的NOX3活性主要是通过p47phox的膜移位来调节。 病并发症。通过研究氧化应激在糖尿病及其并发症发病中 用检测细胞内糖原合成和培养上清中葡萄糖的含量来观察 的作用机制，为防治糖尿病及其并发症提供新的理论依据。 细胞的胰岛素抵抗，结果显示，棕榈酸处理后HepG2细胞内 机体内多种酶体参与了ROS的生成，如NADPH氧化酶 糖原合成量显著降低，细胞培养上清中葡萄糖的浓度显著升 (NOX)、黄嘌呤氧化酶、线粒体呼吸链酶复合体、内皮型一高，提示棕榈酸诱导HepG2细胞产生胰岛素抵抗。为了确 氧化氮合酶(eNOS)及脂氧合酶(LOX)等。本研究旨在探讨 NOX源性ROS在糖尿病及其血管并发症发生中的作用机 制。 细胞，获得低表达NOX3水平的HepG2细胞。分析比较这 l NADPH氧化酶3与游离脂肪酸诱导的肝脏胰岛 素抵抗 NOX3表达后，棕榈酸所引起的ROS升高和胰岛素抵抗均受 到抑制。说明NOX3参与了FFA引起的ROS的生成和胰岛 肥胖引发的FFA水平升高可通过多种途径影响胰岛索 素抵抗。在此基础上，我们进一步探讨FFA诱导HepG2细 的作用及葡萄糖代谢，在胰岛素抵抗的病理过程中占有重要 胞产生胰岛素抵抗的机制，结果显示，0．25mmol／L棕榈酸 的地位。肝脏是胰岛素的重要靶器官之一，肝脏的胰岛素抵 抗在2型糖尿病发生发展过程中发挥重要作用。研究表明， 高FFA诱发的氧化应激是导致肝脏胰岛素抵抗的重要原 因。为了探讨NOX3源性ROS在FFA诱导的肝脏胰岛索抵 过NOX3介导的氧化应激诱导HepG2细胞产生胰岛素抵 抗发生中的作用机制，首先我们用不同浓度(0．15—0．35 mmol／L)棕榈酸处理人肝脏细胞HepG2，通过DCFH—DA荧 路。 光染色结合流式细胞术检测ROS水平的改变。结果显示， 我们用DB／DB小鼠作为胰岛素抵抗模型进一步证实 与正常培养条件相比，棕榈酸导致HepG2细胞中ROS水平 显著升高，其作用具有浓度和时间依赖性。分别用ROS途 用机制。油红0染色结果显示DB／DB小鼠肝脏中脂肪堆 径抑制剂如NOX抑制剂DPI、线粒体呼吸链酶复合体抑制