二类中兽药复方中黄柏总生物碱大孔树脂纯化工艺探究.pdfVIP

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现代化中药制剂发展与中药药理学研究交流会 二类中兽药复方中黄柏总生物碱大孑L树脂纯化 工艺研究 刘丽梅1,陈琳1,王瑞海,扬立新2,刘凤华3,许剑琴4 (1.中国中医科学院中医基础理论研究所,北京100700;2.中国中医科学院中药所,北京100700; 3.北京农学院动物科技系,北京102206;4.中国农业大学动物医学院,北京102206) 【摘要]目的:筛选二类中兽药畜禽抗应激颗粒中黄柏总生物碱火孔树脂纯化j【艺。方法:对 黄桕总生物碱提取液纯化所用大孔树脂型号、洗脱剂浓度、大孔树脂吸附容量、上柱药液pH、上柱 速度、洗脱荆Ⅲ量、洗脱荆流速、洗脱液浓缩浓度、洗脱液浓缩后pH进行考察。结果:黄柏总生 淀低温减压干燥,得黄柏总生物碱,结果表明,该jI:艺稳定,质量可控。提取物中盐酸小檗碱含量 达到57.38%,黄柏总生物碱含量达到59.04%,符合二类中搜要的质量要求。结论:该:r艺稳定, 质量可控,可用丁.产业化生产。 [关键词]黄柏;总生物碱;大孔树脂;纯化 在兽医临床中发现,由黄柏、苍术、藿香、石膏以不同比例组成的二类中兽药复方I和ll,可 chinense 提高猪对高热环境的适应能力,其中黄柏是主药。黄柏为芸香科植物黄皮树Phellodendron Schneid.的干燥树皮,习称“川黄柏”,具有清热燥湿,泻火除蒸,解毒疗疮等功效IIj。黄柏含有多种 生物碱,主要为小檗碱,还有巴马丁、药根碱、黄柏碱、蝙蝠葛任碱、白瓜萎碱、木兰花碱等生物 碱【2】。资料表明黄柏生物碱具有抗溃疡及抗腹泻作用,对免疫功能具有调节作用12J,是本课题提取 的有效部位。课题在确定了黄柏总生物碱提取上艺后pJ,采用人孔树脂纯化,使黄柏总生物碱含量 大于提取物的50%,以符合二类中兽药的要求,现对纯化工艺参数的研究报道如下。 1仪器与试药 l 100高效液相 生化仪器厂),T6紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器设备有限公司),Agilent 色谱仪(美国)。紫外灯(上海精科实业有限公司)。 大孔树脂(山东鲁抗医药股份有限公司),医用酒精(挚友酒精厂),氯仿,甲醇,氨水均为分析纯。 薄层板(烟台市化学jIj业研究所)。 黄柏药材购白河北安国,经中国中医科学院中药所冯学峰研究员鉴定为芸香科植物黄皮树 Phellodendron 版黄柏项下规定IlJ。 2方法与结果 2.1大孔树脂型号的筛选 采JHj不同极性7个型号大孔树脂各1009,按说明书要求进行处理备用。取同一批黄柏细丝,按 154 现代化中药制剂发展与中药药理学研究交流会 已筛选的提取:【艺12】,即加药材lO倍量75%乙醇回流提取3次,每次1.5h,药液同收乙醇,浓缩至 采用不同型号的大孔树脂纯化,分别用水、lO%、30%、50%、95%乙醇或酸醇进行洗脱,收集不同 浓度洗脱样品,进行含量测定。采用HPLC法测定盐酸小檗碱百分含量,采用紫外.可见分光光度法 测定总生碱卣分含量,实验结果见表l。 表1 各种型号人孔树脂纯化黄柏提取物的筛选结果 树脂 生药 洗脱剂 出膏率,% 盐酸小檗 总生碱 总生碱提 型号 量/g 碱含量/% 含量惕 取率慌‘ DM.13045 水.10%乙醇 5.73 ·0.4· 30%乙醇 7 c;鼹 2.26 50%乙醇 O 3● ● ● 86002l 60 10%乙醇 1 4 30%乙醇

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