超声波辅助羟丙基-β-环糊精包埋椒目α-亚麻酸工艺的研究.pdfVIP

J●■_o、 吣鳓鳍匾扇盎吻萨避越窳珊鼬爨 超声波辅助羟丙基一B一环糊精包埋椒目a一亚麻酸工艺研究 张玉静1殷钟意2郑旭煦“-2朱建生1边风霞1 (1．重庆工商大学环境与生物工程学院重庆400067； 2．重庆工商大学药物化学与化学生物学研究中心重庆400067) 摘要：探索了超声波辅助羟丙基一B一环糊精(HP—B-CD)包埋椒目a一亚麻酸的工艺，以包合率为指标，考察了超 声功率、超声时间、无水乙醇+混合脂肪酸：liP-B-cD质量比对包合率的影响，结果表明，在超声功率为300W、超声 时间为20rain、无水乙醇+混合脂肪酸：咿一B咖质量比为1：8下，包合率达90．25％，实现了a一亚麻酸的安全无毒 分离。 关键词：羟丙基一8一环糊精；椒目；a一亚麻酸；超声波；高效液相色谱 中图分类号：$565．9 文献标识码：A 花椒(Zanthoxylumbungeanum 我国传统的“八大调味料”之一。椒目为成熟花椒的种子Ⅲ，内含丰富的多不饱和脂肪酸(亚油酸 和a一亚麻酸)。亚油酸是n一6系多不饱和脂肪酸的前体，可降低胆固醇；a一亚麻酸是n-3系多不饱 和脂肪酸的前体，人体自身酶可将其转化为DHA和EPA，因此Q一亚麻酸提高免疫力和降低胆固醇的效 果尤为突出口q1，这两类脂肪酸只能通过食物供给，人体自身不能合成，因此称为必需脂肪酸。在a一 亚麻酸的提取纯化方面，目前多采用尿素包合法、银离子络合法、硝酸银硅胶柱层析法等阳3，在强 调食品药品安全的今天，本文拟采用安全无毒的羟丙基一B一环糊精(HP-B-CD)分离Q一亚麻酸，拓 展椒目a一亚麻酸的分离纯化方法。 HP—B—CD由葡萄糖分子经衍生后构成，与B一环糊精相比，其常温下水溶性更大，无毒，易与 生物环境相容，溶血作用也显著降低，被视为最有应用前景的B一环糊精衍生物睁101。有关HP—B_cD 的运用已见诸多报道，徐云辉等n¨采用HP—B—CD包合丹皮酚，包合率可达74．85％：张东升等n21采 率为86．31％。关于籽目中a一亚麻酸的分离提取，已见刘静等n钔采用B-CD包合法分离提取的报道， a一亚麻酸的研究，故本文尝试采用超声波辅助HP—B_cD包合法来探索椒目a一亚麻酸的分离提取 工艺。 1材料与方法 1．1材料及试剂 NO 椒目(购自陕西省韩城)、羟丙基一B一环糊精(BATCH 74T005，MaxdragonInt’Ltd，Guangzhou， CHINA)、a一亚麻酸标准品(CAS463—40一l，美国Sigma公司)、亚油酸标准品(CAS506-21-8， 美国Sigma公司)、甲醇(色谱纯)、二次蒸馏水、6孝溶剂油(食用级)，氢氧化钠、95％乙醇、 磷酸、石油醚、浓盐酸、无水硫酸钠等均为分析纯。 基金项目：重庆市科技攻关项目(CSTC，2011AB5007)资助。 60 I会议文集IPRnCPEDm J■■-_’、 露置脑盎吻萨她趱窳鄱泗懋《黝 1．2主要仪器 高效液相色谱仪(Beckman StratosD-37520Osterode)、 Coulter)、高速冷冻离心机(Biofuge CHRIST 超声波细胞粉碎机(宁波新芝生物科技股份有限公司)、旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)。 1．3实验方法 1．3．1椒目油脂提取 冰柜冷冻24h，冷冻离心，即得到椒目油样品。 l-3．2混合脂肪酸(FFA)制备 1．Omol／LNa0H一乙醇溶液，搅拌、 取lOOg椒目油样品，置于1000mL磨口三口瓶中，加入250mL 加热回流40min，至溶液澄清透明，冷至40℃过滤，再将冷至室温的滤液置于冰箱12h，使皂析出， 减压抽滤，用冷冻乙醇洗涤，即得皂化物，将其转入烧杯中，加入适量水使皂溶解，用1096盐酸调 pH值为2