除草剂降解菌的分离鉴定、降解基因克隆表达和代谢途径分析.pdfVIP

大会报告摘要 优良特性的新型酶制剂提供了新思路，拓宽了微生物利用的空间，对提升我国微生物研发水平和国际竞 争力具有重要意义。 本研究通过宏基因组方法从海底泥中获得一株具有高效转糖基化性能的p．半乳糖苷酶，该重组p 半乳糖苷酶不仅能够在大肠杆菌表达体系中得到高可溶性表达，而且通过壳聚糖．戊二醛共价交联固定 后，酶的活性和稳定性得到了明显提高。在此基础上，进一步研究了固定化酶在不同的温度、pH值、不 同的双向反应体系和起始乳糖浓度对低聚半乳糖合成的影响，发现水解乳糖和合成低聚半乳糖所需的最 适条件并不相同，利用有机溶剂作为反应介质有利于低聚半乳糖的合成。将不同的有机溶剂(DMso、 乙腈、乙酸乙酯、正丁醇、醋酸丁酯、环己烷和正庚烷)分别与O．1M磷酸缓冲液按一定比例混合组成 20ml反应体系，转糖基化反应的研究结果表明：环己烷：磷酸缓冲液=95：5(v～)反应体系合成寡糖的 效果最佳。因此，合成低聚半乳糖的最适反应条件如下：在20111l反应体系中，环己烷：磷酸缓冲液=95：5 h时，固定化酶能够连续反应15次，低聚 (v，v)，起始乳糖浓度为20％(w／『v)，T=50℃，pH=7．5，t=20 半乳糖产量超过50％。表明固定化酶具有活性高、稳定性好及转糖基化能力强的突出优点，具有规模化 生产的潜力。 图l： 重组8．半乳糖苷酶转糖基化反应生成低聚半乳糖的薄层层析(TLC) l，反应生成产物；2，葡萄糖、半乳糖和乳糖标准样品． 除草剂降解菌的分离鉴定、降解基因克隆表达及代谢途径分析 崔中利，侯颖，雷慧，量维亮，陶建 南京农业大学农业部农业环境微生物重点开放实验室，南京，2l0095 摘要。除草剂的大量使用也引起了了人们对环境问题的日益关注，解决污染的手段与方法不断地被 提出和更新，其中利用微生物降解污染物的研究已成为近年来讨论比较热烈的问题。芳氧苯氧丙酸类除 草剂和氯乙酰胺类除草剂是我国除草甘膦以外，使用最多的两大类除草剂，并且这两类除草剂的品种多， 使用量大；在解决了农田杂草危害的同时，也给环境带来了巨大的污染。本研究以精嗯唑禾草灵和乙草 胺为底物，对芳氧苯氧丙酸类和氯乙酰胺类除草剂降解微生物进行了研究，以期为这两大类除草剂污染 的生物修复提供理论基础。 一、精嚼唑禾草灵降解菌的分离鉴定及降解特性研究 从长期受农药污染的土壤中分离出能够快速降解精嚼唑禾草灵的菌株Tl，根据表型特征、生理生化 20 女台报告摘要 降解80％以上，其降解技祟远远高于已报道的菌株．因此，由这三个菌株制成复合菌液，对乙草胺和丁 草胺污染的生物修复有很大的应用价值。 转基因水稻对土壤甲烷排放及其相关功能微生物的影响 韩成’，M标2，贾仲}3．中1收o．#t辉 (’南京*范七学地理科学学％，南京210046：!环境保护部南京环境科学研宽所，南京210042：3十目科学＆南京土 壤研宽所．南京210008) 摘要：转基因作物在农业生产中的应用引起了农业生产方式的巨大变革和经济效益的大幅度提高， 它为人类解决目前所而临的粮食安全、人口与资源、环境的矛盾等提供了一条新的思路和途径，另一方 面它可能造成的负面影响特别是对生态环境的负面影响也引起世界各国科学家的关注。水稻田是主要温 室气体c|14最重要的来源之一。研宄转基因水稻田甲烷排放规律，转基因水稻根际土壤产甲烷古菌、“活 跃的”产甲烷古苗、甲烷氧化细菌群落结构和数量，对于认识和评价转基因水稻对温室气体排放和相关功 能微生物的影响具有重要意义，目前在这方面研究报道比较少。 材料方法：本研究选用的转基因水稻为抗虫转基因水稻品种Tr51(c，y“6伽“c融合基因)，以 田进行。盆栽实验采集已经连续种植5年的转基因水稻土壤和亲本水稻土壤，分别种植转基因和亲本水 稻。采用PcR．DGGE和R髓l—nmePcR技术，研究转基因和亲本水稻之间．土壤c}k排放差异较为突出 的水稻生长阶段(苗期、分蘖期和晒田期)水稻根际土壤产甲烷古苗群落及衷层土壤甲烷氧化细菌群落 差异．运用稳定同位素标记(sP)和PcR—DGGE联用技术研究分蘸期转基因水稻根际“活跃的”产甲