不同倍性枇杷SCoT标记技术体系的建立应用.pdfVIP

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2017-08-10 发布于安徽
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不同倍性枇杷SCoT标记技术体系的建立应用.pdf

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不同倍性枇杷SCoT标记技术体系的建立与应用韩国辉，汪卫星，向素琼，贾志刚，郭启高，秦国新，何桥，李晓林，梁国鲁。 (南方山地园艺学教育部重点实验室／西南大学园艺园林学院，重庆400715) 摘要z以‘软条白沙’枇杷三倍体株系为试材，采用L25(56)正交设计方法，对影响枇杷 DNA聚合酶及模板DNA用量等I埘素进行优化筛 SCoT-PCR反心的M92+、dNTPs、引物、Taq 选，并对最适退火温度进行了探讨。建立了适于不同倍性枇杷分析的SCoT-PCR扩增体系，即 mmol·L一，dNTPs0．35 20此的优化体系中含有：Mg+1．5 mmol·L～，引物o．5pmol·L一，Taq酶 0．5 50 U，模板DNA ng。引物最适退火温度为51．8C。应用优化的反应体系，对三个枇杷品种 (‘泸州六号’：2x，3x，4x，5x；‘龙泉l号’：2x，3x，4x；‘早红3号’：2x，3x，4x)的lO 个不问倍惟株系进行扩增，结果表明。9个引物共扩增Ill128条带，片段大小为100．2000 bp，其中多态性条带84条，多态率为65．6％，与相心的二倍体比较，多倍材料均发生了不问程度的遗传变异。关键词t枇杷i多倍体；目标起始密码子多态性l正交优化l遗传分析 Establishmentand ofSCoT in optimizationsystempolyploidyIoquats HAN Guo-xin， Guo-hui，WANGWei-xing,XIANG Su-qiong,J认zhi-gang,GUOQi-gao，QIN HE Guo-lu。 Qiao，LIXiao-lin，LIANG HorticultureScienceSouthernMountainous (KeyLaboratoryof for Regions，Ministryof and Architecture,Southwest ofHorticultureLandscape Education—College 400715 ’ China) t was method Abstract：Tdploid‘ruantiaobasha’Ioquatused够materials．orthogonaldesign was to SCoToPCR of infivefactors appliedoptimize amplificationsystemIoquat such豳MgZ+． DNA and DNAatfive the levels，and dNTPs．primers。Taqpolymerasestemplate annealing wasalso SCoT-PCR temperatureandoptimized．Anoptimal amplificationsystem(20pL)o