可见和紫外分光光度法.pptVIP

可见(Vis)和紫外(UV)分光光度法 偶数3组 组员：吴洋凤，何晴，胡婷，潘约姑子 主要提纲 显色与显色条件的选择 测量条件的选择 分光光度法的应用 2.6.1 显色与显色条件的选择 2.6.1 显色反应及显色剂 显色反应的分类：1.氧化还原反应 2.配位反应 显色剂的分类：1.有机显色剂 2.无机显色剂 （1）.对显色反应的要求：灵敏度高，选择性好，提高测量的准确度，化合物组成恒定且性质稳定。 (2).显色剂λ 1.无机显色剂 许多无机试剂可与金属离子生成有色化合物。但由于生成物的稳定性或灵敏度等原因，能用于光度分析的不多。目前应用较多的主要有硫氰酸盐、钼氨酸和过氧化氢等。 2.有机显色剂 大多数有机显色剂本身为有色化合物，与金属离子反应生成化合物一般是稳定的螯合物。显色反应的选择性和灵敏度都较高，有些有色螯合物易溶于有机溶剂，可进行萃取光度法。 从以上三个图中可以得到 （1）可以选用的用量较宽 （2）可以选用的用量较窄 （3）表明随着显色剂用量的增加，吸光度也不断增大 影响：（1）溶液的酸度对显色反应的影响是多方面的：例如由于显色剂大多是有机弱酸，酸度影响显色剂的离解，因而影响显色剂反应的完全程度。又如许多显色剂本身就是酸碱指示剂，配位反应后的颜色必须与显色剂本身的颜色有显著的不同。二甲酚橙pH＞6.3呈红紫色，pH＜6.3呈黄色，与金属配合物则呈红色，故适合于pH＜6.3的条件。 （2）显色时间、温度等因素的影响：由于反应速率不同，完成反应所需的时间常有很大的差别，同时有色化合物放置过程中也会发生变化。 有的迅速反应且能稳定较长时间（如Fe3+与磺基水杨酸反应）。有的放置一段时间反应才达到平衡，溶液颜色才达稳定程度（如硅钼蓝的生成）。 有的放置一段时间后由于各种原因，如空气氧化、试剂分解活挥发、光照射等而褪色。 2.7 测量条件的选择 2.7.1 入射光波长的选择 为什么在分光光度法测定中要选择λmax作为入射光波长？ 为什么在测定高浓度组分要选用灵敏度稍低的吸收峰波长作为入射波长？ 答：（1）因为在最大吸收波长λmax处测定吸光度不仅能获得搞得灵敏度，而且还能减少有非单色光引起的对朗伯-比耳定律的偏移。 （2）为了保证其标准曲线又足够的线性范围。 2.7.2 参比溶液的选择 实验中，我们要合适的选择空白溶液作为参比溶液来调节仪器的零点，以便消除显色溶液中其他 有色物质的干扰，抵消吸收池 和试剂对入射光的影响。所以，应采用光学性质相同 、厚度相同的比色皿装好参比溶液，调节仪器使透过参比的吸光度为零。 测得试液的吸光度为下式： A=Ig? ? ≈ ? ? 常用的参比液有：溶剂参比、试剂参比、试样参比、褪色参比等。 选择参比溶液的原则 如果待测物与显色剂的反应参物有吸收，以纯溶剂做参比； 显色剂或其他试剂有吸收，以空白溶液作参比； 试样中其他组分有吸收，但不与显色剂反应，显色剂无吸收，以试样做参比溶液； 显色剂略有吸收，试液中加掩蔽剂再加显色剂作为参比溶液。 总之，选择参比溶液时，应尽可能全部抵销各种共存有色物质的干扰，使试液的吸光度真正反映待测物浓度。 2.7.3 吸光度范围选择与控制 由下表可知，T%在80%~10%即A=1~0.1时浓度测量的相对误差较小。对于精度较好的仪器，当T%在60%~20%时，测量误差约为1%。当T=0.368或A=0.434时，浓度的测量误差最小。 在实际测量中通过调节被测溶液的浓度或使用厚度不同的吸收池，创造条件使测量在适宜的吸光度范围（A=0.2~0.8）内进行。 2.7.4 比色皿的使用 比色皿使用注意事项 比色皿一般为长方体，其底及两侧为毛玻璃，另两面为光学玻璃制成的透光面采用熔融一体、玻璃粉高温烧结和胶粘合而成。 即：①哪比色皿时，手只能拿毛面不能拿光面； ②具有腐蚀玻璃的物质的溶液不可长期盛放在比色皿中；（例：F--、SnCl2、H3PO4) ③不能将比色皿放在火焰和电炉上进行加热或干燥箱内进行烘干； ④比色皿使用后立即冲洗干净，若比色皿里