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实验设计的“三原则” 随机原则 对照原则 重复原则 * 随机原则 在抽样或分组时必须做到使总体中任何一个个体都有同等的机会被抽取进入样本,以及样本中任何一个个体都有同等机会被分配到任何一个组中去 实现随机化的方法: 抽签 查随机数字表或随机排列表 利用计算机产生的伪随机数 通过随机化,降低系统误差的影响 * 随机数字表 * 对照原则 目的:通过对照来鉴别处理因素与非处理因素之间的差异,抵消或减少试验误差(实验对象来源、种属、性别、年龄、体重、实验条件、实验方法等) 分类: 自身对照:是把实验动物本身在实验前、后两阶段的各项相关数据,分别作为对照组和实验组的结果并进行统计学处理。 平行对照 * 平行对照组: 空白对照(正常对照,阴性对照): 使用不具致病或药理作用的物质作为对照(生理盐水、溶剂) 标准对照(阳性对照):用已证实有效、公认或已批准上市的药物作为对照 相互对照:实验中各实验组之间互为对照(不同剂量组) 模型对照:在某有关实验条件下所设对照(疾病模型对照、老年对照等) * 重复原则(三层含义) 对某样品进行观测时,为了减少方法和操作等带来的误差,将每一个样品分成n份,测出各份样品某指标的观测值,用它们的算术均数作为每个样品该指标的直接观测值 在相同的试验条件下,独立重复地观测n个样品(或受试对像),这就是通常所指的“重复试验”,其目的是为了降低以个体差异为主的各种试验误差 在部分或全部试验条件有规律地变动时,从同一个样品(或受试对像)上重复测量到n个数值,称为具有重复测量的试验或设计 * 计量资料的样本数每组不少于5例(10-20例) 计数资料的样本数每组不少于10例(30例) * 动 物 计量资料 计数资料 小(小鼠、大鼠、蛙) ≥10 ≥30 中(兔、豚鼠) ≥6 ≥20 大(犬、猫) ≥5 ≥10 利弊 重复利于排除个体差异对观测结果的影响。 样本含量n过大:人力不够,工作粗枝大叶,资料可靠度低) 样本含量n过小:统计规律无法显露出来 针对具体情况,根据专业和统计学知识作出合理的估计 * 实验设计的“三原则”——实例 阿魏酸钠对雷公多藤甙所致小鼠急性肝损伤的影响 【实验方法】 取小鼠40只,随机分为5组,每组8只。模型对照组雷公藤多甙片悬液灌胃900 mg/kg每天2次,连续6天。阿魏酸钠小、中、大剂量组分别腹腔注射50、100、150 mg/kg 连续9天,于第4天起于注射阿魏酸钠1 h 后,灌胃雷公藤多甙片悬浊液900 mg/kg,4 h 后再重复灌胃雷公藤多甙片悬液一次。空白对照组给予等量的生理盐水。末次给药4 h后眼眶取血,放置1 h后制备血清,并剪开腹腔取出肝脏,测定肝脏指数。 * 实践 题目:肝损伤对药物作用的影响 参考资料: 四氯化碳:一种良好的有机溶剂,典型的肝脏毒物 戊巴比妥钠镇静催眠药,主要经肝脏代谢 动物睡眠判断指标:翻正反射(指动物体处于异常体位时所产生的恢复正常体位的反射) * * 科研选题与实验设计 杨哲琼 武汉大学基础医学院药理学系 探索性实验与流程 * 科研选题 * 选题的基本原则——“三性” 科学性: 选题应建立在前人的科学理论和实验研究基础之上,应符合科学规律,而不是毫无根据的胡思乱想。 创新性: 选题具有自己的独到之处,或提出新规律、新见解、新技术、新方法,或是对旧有的规律、技术、方法有所修改和补充。 可行性: 选题切合研究者的学术水平、技术水平和实验室条件,使实验能够顺利实施。 * 选题基本程序 * 科研选题与文献检索 立题依据主要来源于: 科学领域中存在的空白之处 文献检索给予的启发 文献报道中存在的矛盾与争议问题 前期研究中的新发现 为了立题和提出立题依据,必须进行文献检索,包括本研究领域内的国内外研究状况、必威体育精装版热点和前沿问题等。 * 文献检索 * 文献检索内容 研究领域的国内外研究状况(如综述、论文前言和讨论) 必威体育精装版热点和前沿问题(研究意义显著、近年内论文篇数) 研究空白点(相关研究论文的篇数) 研究内容(借鉴其他相似研究) 技术路线 检测指标 研究手段 统计方法 ...... * 中国期刊网 中文文献检索方法 * * * * 英文文献检索方法 * * * * * 实验设计 * 实验设计的“三要素” 实验对象 处理因素 实验效应 * 实验对象 分类 种属: 人 动物 实验水平: 整体动物:正常动物、疾病模型、转基因动物等 离体器官:子宫、心脏、小肠等 离体组织:肛尾肌、血管条等 细胞:肝细胞、心肌细胞等 * 动物种属的选择 常用小鼠、大鼠 中枢神经—猴 心血管—猫 抗过敏—豚鼠 正常动物选择的一般原则 年龄、体重 如小鼠18~28 g, 大鼠180~280 g 性别 药效多有
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