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第三章 蛋白质化学 1. 蛋白质的组成成分 2. 氨基酸的性质 3. 氨基酸的分离与测定 4. 肽 5. 蛋白质的分类 6. 蛋白质的一级结构 7. 蛋白质的高级结构 8. 几种典型蛋白质的结构与功能 9. 蛋白质结构与功能的关系 10.蛋白质的性质 11.蛋白质的分离、纯化与测定 蛋白质-英文为“Protein”——第一重要 一、蛋白质的元素组成 主要的: C H O N S 50~55% 6~8% 20~23% 13~19% 0~4% 微量的: P Fe Cu Zn Mo I Se 大多数蛋白质含氮量较恒定,平均16%,即1g氮相当于6.25g蛋白质。6.25称为蛋白质系数。 每克样品含氮量×6.25×100=蛋白质含量(g%) 二、蛋白质的水解 1.酸水解 二、蛋白质的水解 2.碱水解 二、蛋白质的水解 3.蛋白酶水解 蛋白质的水解产物: 牛胰脏核糖核酸酶蛋白分子氨基酸组成 含有氨基的羧酸——氨基酸(AA) 1. 化学结构 R-CH(NH2)-COOH R 代 表 氨 基 酸 之 间 相 异 的 部 分 , 叫 R 基 (R group), 又 称 为 侧 链 (sidechain) 。 无色晶体、溶于水 地 球 上 天 然 形 成 的 氨 基 酸 有 300 种 以 上 , 但 是 构 成 蛋 白 质 的 氨 基 酸 只 有 22 种 , 且都是α-氨基酸(可能还存在更多的)。 提问:什么是α-氨基酸? 答:----C-C-C-C-COOH γβα ----C-C-C-C(NH2)-COOH α-氨基酸 ----C-C-C(NH2)- C - COOH β-氨基酸 ----C-C(NH2)- C - C - COOH γ-氨基酸 一)、构成蛋白质的氨基酸 2、按侧基R基的结构特点分: 3、按侧基R基与水的关系分: (1)非极性氨基酸:甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸、脯氨酸。 (2)极性不带电氨基酸:天冬酰胺、谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸。 (3)极性带电氨基酸:天冬氨酸、谷氨酸、赖氨酸、精氨酸、组氨酸。 4、按氨基酸是否能在人体内合成分: 20种基本氨基酸图示 构 成 蛋 白 质 的 前 二 十 种 氨 基 酸 的 名 称 、 符 号 、 化 学 结 构 和 疏 水 性 指 数 。 指 数 愈 正 表 示 疏 水 性 愈 强 。 苯丙氨酸 蛋白质中不常见的氨基酸 (二)非蛋白氨基酸 第二节氨基酸的性质 一、氨基酸的光学活性和光吸收值 二、氨基酸的解离和两性性质 三、氨基酸的化学反应 一、氨基酸的光学活性和光吸收值 构成蛋白质的氨基酸除甘氨酸外,均含有α-碳原子,在空间各原子有两种排列方式:L-构型与D-构型,它们的关系就像左右手的关系,互为镜像关系。 以丙氨酸为例: 二、氨基酸的解离和两性性质 氨基酸的水溶液既可被酸滴定,又可被碱滴定,所以具有两性电离的性质,现以甘氨酸为例来说明氨基酸两性电离的特点。 甘氨酸的电离酸碱滴定曲线: 由氨基酸的滴定曲线,可用下列 Henderson-Hasselbalch 方程求出各解离基团的解离常数(pK’): 氨基酸等电点的计算: 中性氨基酸: 氨基酸等电点(PI)的计算 中性氨基酸:PI=1/2(pk1+pK2) 酸性氨基酸:PI=1/2(pk1+pKR) 碱性氨基酸:PI=1/2(pk2+pKR) 中性氨基酸pI一般为6.0 提问:为什么偏酸性? 答:-COOH解离程度略大于-NH2的得电子能力 提问:酸性氨基酸的pI(更偏酸、更偏碱)? 答:更酸(3.0 左 右) 碱 性 氨 基 酸pI 更 碱(7.6~10.7)( 只 有 三 种) 提 问: 大 多 数 氨 基 酸 在 中 性(pH=7) 时, 带 电? 等电点时的氨基酸——溶解度最小,易于沉淀 三、氨基酸的化学反应 由α-氨基参加的反应: (2)与甲醛的反应:氨基酸的甲醛滴定法 用过量的中性甲醛与氨基酸反应,可游离出氢离子,然后用NaOH滴定,从消耗的碱量可以计算出氨基酸的含量。此法称为间接滴定法。 (3)酰化反应: (4)与2,4-二硝基氟苯(DNFB)的反应:----肽链末端分析 (5)成盐反应: 由α-羧基参加的反应: (1)成盐反应: (2)成酯反应: (3)酰化反应: (4)脱羧反应: α-氨基与α-羧基共同参加的反应 蛋白质的颜色反应 第三节氨基酸的分离与测定 层
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