新药研发的药理毒理研究操作要点(48页).ppt

该试验多用于中药和毒性较小的其它药物研究 指药物以最高浓度和最大容积的给药，剂量可能并未达到最大耐受的剂量，所以该剂量被称为最大给药量。 具体要求可参照最大耐受量试验。 低毒药物，口服给药：5g（或ml）/kg 动物数一般 ≥ 5只，大鼠禁食一夜，小鼠禁食4－6小时，观察14天，如无死亡，则无必要进行更高剂量 如动物在5g/kg出现死亡，可选择较低剂量 毒理研究- 急毒 最大给药量试验 限量试验 长期（重复给药）毒性 毒理研究- 长毒 观察动物在给予超过临床剂量（数倍或数十倍）和用药周期（3-4倍以上）的情况下所出现的毒性反应 设法发现引起毒性反应的剂量、剂量与毒性之间的关系、中毒表现和程度、主要毒性靶器官或组织及可逆程度等 预测临床研究阶段可能的安全范围和毒性，预先制定防治措施或避免某些有特殊疾病患者的使用，减少临床可能的风险 为临床试验初始剂量和指标的选择等提供重要参数 毒理研究- 长毒 长期毒性研究目的 通常长毒始于主要药效、安全药理、单次给药毒性、初步药代动力学（如果已经可获得）等试验之后 有些药物侧重比较毒理学的研究，如新的剂型、改变酸根或碱基、改变给药途径等。 毒理研究- 长毒 试验方案设计- 基本原则 l????动物的种类 常用大鼠和犬或敏感动物。创新药一般2种以上，雌雄各半。生物制品多用大鼠和猴（种属特异性可特殊） l?? 动物的年龄与数量 大鼠试验3月内：6-8周龄； 3月：5-6周龄 犬：一般选用性成熟的，6-10月 ；猴：3.5-4.5年 根据试验周期长短确定每组动物数。 原则：试验结束时小动物每组动物数应满足统计学要求； 大动物的数应满足毒理学评价要求； 一般大鼠为10-30只，雌雄各半；犬、猴至少雌、雄各3只；毒性大、周期长数量应增加，考虑恢复期数量。 毒理研究- 长毒 试验方案设计- 试验动物 给药时间 临床给药周期的3-4倍。反复、长期或植入的药， 按最长给药时间，即啮齿- 6月；非啮齿-9月 周期短 - 每天给药；1个月- 6天/周 - 每天给药时间应一致 - 保证动物摄入量的准确性 中药如给药体积大，可将药物分成 2次/日 - 不提倡采用掺食给药，除非有稳定性、均一性 毒理研究- 长毒 试验方案设计- 给药方案 给药剂量 一般3个给药剂量组 高剂量 - 动物应出现毒性和个别死亡（20%） 低剂量 - 等于或略高于有效剂量 ，无毒性 中剂量 - 介于以上两者之间 ，轻微毒性 或者按急毒结果： LD50法 (1/10, 1/50, 1/100) MTD法 (1, 1/3, 1/10) 毒理研究- 长毒 试验方案设计- 给药方案 对照组的设置 - 通常给药组和对照组的动物数应基本相等 - 对照组可根据试验方案的具体要求和研究目的设立 阴性对照组、溶媒对照组 观察指标 全面、针对特点 一般体征、饮食、体重变化；血尿常规、血液及血液生化指标、心电图，脏器/体重系数、重要组织器官的肉眼和病理组织学观察、死亡情况。应记录毒性症状出现、减轻或消失的时间。体重和进食量每周测1-2次。 周期3月的，1/3动物检查中期主要指标； 如发现异常可适当增加检查次数。 毒理研究- 长毒 试验方案设计- 给药方案 致突变（遗传毒性） 目前建立的遗传毒性试验是研究机体遗传物质受外源性化学物质或其它环境因素作用时对有机体产生的遗传毒性作用。 遗传毒性试验包括体外和体内检测系统。两者应结合进行研究。 体外检测系统包括细菌回复突变、微核试验、哺乳动物细胞染色体畸变等；体内试验包括骨髓微核试验、显性致死试验等。 一类药需要提供实验资料 毒理- 致突变 生殖毒性试验 评价药物对哺乳动物生殖的影响，推测对人可能的生殖毒性 研究分为三段 I段（一般生殖毒性）：是评价对成年动物生育力和早期胚胎发育影响，评价药物对配子成熟，交配行为、受孕、胚胎着床前和着床的影响 II段（致畸敏感期毒性）：即妊娠动物在胚胎器官形成期给药，评价药物对亲体、胚胎、胎仔发育影响 III段（围产期毒性）：在妊娠动物分娩前后给药，评价胎仔出生前后的发育和孕鼠从妊娠后期至断奶期间给药对妊娠、分娩、哺乳、胚胎、胎仔发育的影响。 根据临床用药次数、适应证和拟用人群决定是否进行该试验 创新药，一般可在申报临床研究前先提供II段试验 对于可能只给一次