果胶实验方案.docVIP

果胶提取 1方法 1.1原料制备 称取10克冬青，切碎，放入烧杯中。在烧杯中加入蒸馏水，用水浴锅加热到90度，加热10分钟，以除去果胶酶。过滤， 将滤液用蒸馏水多次洗涤，直到滤出液变得澄清，以出去色素。 1.2果胶提取 把滤渣放入烧杯中，加入盐酸，调节PH至2，放到水浴锅中，100度加热1.5小时。过滤 ，得到的溶液就是果胶溶液，向其中加入等量的稍多的无水乙醇。即可得到湿果胶 2果胶提取的单因素实验， 2.1 提取温度对果胶提取率的影响， 在PH 2，加热时间1.5小时，料液比1：10的条件下。设置 50℃ 60℃ 80℃ 100℃ 120℃ 做一组实验。 2.2 PH对果胶提取率的影响 在温度100℃加热时间1.5小时，料液比1：10的条件下。设置PH 1 2 3 4 5做一组实验 2.3 提取时间对果胶提取率的影响 在温度100℃ PH 2 ，料液比1：10的条件下。设置加热时间 50min 60min 80min 100min 120min做一组实验。 2.4料液比对果胶提取率的影响 在温度100℃加热时间1.5小时，PH为2的条件下。设置料液比为1:6 1:8 1;10 1;12 1；14做一组实验。 3 实验目的 在单因素的基础上找出每个因素下的最优条件，为正交实验做准备。 4.果胶的干燥（四种方法） 1.果胶干燥大多采用喷雾干燥，即用压力式喷雾干燥，将浓缩液在进料温度150～160℃，出料温度220～230℃的条件下干燥，连续化操作中可不断得到粉末状产品。100 mL烧杯中，加入30 mL无水乙醇洗涤湿果胶，再用尼龙布过滤、挤压。将脱水的果胶放入表面皿中摊开，在60～70?℃烘干。将烘干的果胶磨碎过筛，制得干果胶。 3．冷冻干燥。将湿果胶冷冻，然后在较高真空下将溶液蒸发而干燥的方法。 4.用布氏漏斗过滤得到果胶沉淀，把果胶移动于烧杯中用95%乙醇洗涤吸过滤。搓碎放于表面皿中在干燥器中过夜，用研钵研磨得到果胶粉，计算产率 5果胶的纯度检验 1.重量法 2.咔唑比色法测定果胶含量 （1）原理 果胶经水解，其产物半乳糖醛酸可在强酸环境下与咔唑试剂产生缩合反应，生成紫红色化合物，其呈色深浅与半乳糖醛酸含量成正比，由此可在530nm波长下比色测定。 （2）仪器与试剂 仪器：分光光度计，50mL比色管； 试剂：精制乙醇，乙醚，0.05mol/L HCl，0.15%咔唑乙醇溶液，半乳糖醛酸标准液，硫酸（优级纯） ①精制乙醇的制备：取无水乙醇或95%乙醇1000mL，加入锌粉4g，硫酸（1:1）4mL，在水浴中回流10小时，用全玻璃仪器蒸馏，馏出液每1000mL加锌粉和氢氧化钾各4g，重新蒸馏一次。 ②0.15%咔唑乙醇溶液的配制：称取化学纯咔唑0.150g，溶解于精制乙醇中并定容到100 mL。咔唑溶解缓慢，需加以搅拌。 ③半乳糖醛酸标准溶液：称取半乳糖醛酸100mg，溶于蒸馏水中并定容至100mL。用此液配制一组浓度为10～70 μg/mL的半乳糖醛酸标准溶液。 （3）操作步骤： A、提取果胶 同重量法。原料→热乙醇回流钝化酶、去杂→提取（酸解提取总果胶或热水提取水溶性果胶）→果胶提取液、定容。 B、标准曲线的制作 取8支50mL比色管，各加入12mL浓硫酸，置冰浴中，边冷动边缓慢地依次加入浓度为0、10、20、30、40、50、60、70 μg/mL的半乳糖醛酸溶液2 mL，充分混合后，再置冰浴中冷却。然后在沸水浴中准确加热10 min，用流水速冷至室温，各加入0.15%咔唑试剂1mL，充分混合，置室温下放置30min，以0号管为空白在530nm波长下测定吸光度，绘制标准工作曲线。 C、样品果胶含量的测定 取果胶提取液，用水稀释到适当浓度（在标准曲线浓度范围内）。取2mL稀释液于50mL比色管中，按标准曲线制作方法操作，测定吸光度。对照标准曲线，求出稀释的果胶提取液中半乳糖醛酸含量（C μg/mL）。 D、结果计算 式中：C—对照标准曲线求得的果胶提取稀释液的果胶含量（μg/mL）； V—果胶提取液原液体积（mL）； K—果胶提取液稀释倍数； W—样品质量（g）； 106—质量单位换算系数。