专题一基因工程知识点汇总.doc

专题一 基因工程知识点汇总 1．1 DNA重组技术的基本工具 一、基因工程的原理：基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外 和 ，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在 水平上进行设计和施工的，因此又叫做 。 1.“分子手术刀”——（1）来源：主要是从中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的断开，因此具有性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：和。2.“分子缝合针”——(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合。②区别：E·coliDNA连接酶来源于，只能将双链DNA片段互补的末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合，但连接的之间的效率较低。(2)与DNA聚合酶作用的异同:? DNA聚合酶只能将加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接的末端，形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”——载体并具有自我复制能力的DNA分子② 种类 基因组文库：含有一种生物的 基因，用 方法构建。 cDNA文库：含有一种生物的 基因，用 方法构建。 ③ 目的基因的获取：根据基因的有关信息：基因的 序列、基因在 上的位置、基因的 产物mRNA、基因的 产物蛋白质等特性获取目的基因。 （2）利用PCR技术扩增目的基因。 ① PCR：全称为_______________，是一项在生物____复制___________的核酸合成技术。 原理： ② 条件：已知目的基因的 序列。一对 ；四种 ； 酶（ 酶）。 ③ 过程：目的基因DNA受热变性（90-95）形成 ，冷却（退火55-60）后与 结合，然后在 ______的作用下进行延伸（70-75）成DNA。 ④ 方式：指数扩增=2n（n为扩增循环的次数） （3）人工合成法： 适用于 较小，核苷酸序列已知，通过 ，用化学方法直接人工合成。二、基因表达载体的构建 1.目的：2.组成：目的基因＋＋＋（1）启动子：是一段有特殊结构的，位于基因的，是识别和结合的部位，能驱动基因，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的 ，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中，从而将筛选出来。常用的标记基因是。农杆菌→ →目的基因整合到植物细胞染色体上→通过 方法培养成再生植株，目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。 （2） ：是单子叶植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高。 （3） ：这是我国科学家独创的一种方法，是一种十分简便经济的方法。（我国的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的） 2．将目的基因导入动物细胞（1）方法： 技术。 （2）操作程序：目的基因表达载体 →取卵（受精卵） →显微注射→注射了目的基因的受精卵移植到____性动物的 ______________________内发育→新性状动物。 3．将目的基因导入微生物细胞 （1）原核生物特点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。 （2）转化： 处理细胞→ 细胞→表达载体与感受态细胞混合→ ___ 细胞吸收DNA分子。 四、目的基因的检测与鉴定 1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用。2.其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用。3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取，用相应的进行杂交。4.有时还需进行 的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状1.植物基因工程：抗虫、抗病、抗逆转基因植物，利用转基因改良植物的品质。2.动物基因工程：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物3.基因工程药物。来源：利用转基因的 生产药物。成果：人胰岛素、细胞因子、抗体、疫苗、激素等。 4、基因治疗：把正常的外源基因导入病人体内，使该基因表达产物发挥作用。专题二、细胞工程一植物细胞工程 理论基础（原理）.植物组织培养技术过程：离体的――→愈伤组织 ――→ ―→试管苗 此过程细胞分裂的主要方式为 。繁殖方式是 繁殖，优点 。 如果培养花药属 繁