丹参指纹图谱研究与分类鉴别.doc

丹参指纹图谱研究与分类鉴别 郁 露，吴京洪* 广州中山大学化学与化学工程学院分析科学研究所，广州，510275 摘要 本文分别利用FTIR光谱无损分析法、硅胶柱层析法和薄层色谱分析法对不同产地的丹参药材进行分析测定，发现不同产地丹参的粉末和柱层析后的红外吸收峰的位置和相对强度存在差异，并且薄层色谱法中各个产地丹参的相应色带的Rf值也有所不同，根据这些特征，可以实现对不同产地丹参的鉴别。 关键词 丹参 傅立叶变换红外光谱 柱层析 薄层层析 鉴别 丹参为唇形科(Labiatae)植物丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.)的干燥根和根茎,具有祛瘀止痛,活血通经、清心除烦之功效,临床上常用来治疗月经不调,经闭痛经,瘕积聚,胸腹刺痛,热痹疼痛,心烦不眠,肝脾肿大,心绞痛等。现代科学研究表明,丹参的活性成分为两类,一类为脂溶性的二萜醌类,另一类为水溶性的酚酸类化合物[1]。 对于不同产地的同种药材,通常会因气候和地理位置的差异而使药材中各混合物的成分和相对比例有所不同，进而药效产生差异,同时也影响到疗效。为此,本文利用FTIR光谱无损分析[2]、硅胶柱层析[3]和薄层层析[4]三种方法，分别提取不同产地丹参的特征。结果表明: FTIR光谱法可为中药材的快速分析和鉴别提供一种较直观、简便的手段；不同产地的丹参经过硅胶柱层析后，各个色带洗脱所用的淋洗液体积以及相应色带的红外吸收均存在差异；薄层层析后，各个产地丹参的相应色带的Rf值也有所不同。根据这些特征，可以对不同产地的丹参药材进行鉴别。 1 实验部分 1.1 仪器和试剂 傅立叶变换红外光谱仪（德国BRUKER 公司 VECTOR22型）,中红外ＤＴＧＳ检测器,测定范围4000～400ｃｍ-1,分辨率1ｃｍ-1； 紫外－可见分光光度计（美国VARLAN 公司 CARY100 型）；旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂 RE52CS 型）； 层析用硅胶（青岛海洋化工厂）；乙酸乙酯、石油醚、无水乙醇、乙醚、苯、甲醇等均为分析纯（广州化学试剂一厂）。 表1 丹参品种鉴定 药名 产地 拉丁名 丹参 湖北 Salvia miltiorrhiza Bge. 丹参 河北 Salvia miltiorrhiza Bge. 丹参 山西 Salvia miltiorrhiza Bge. 丹参 湖南 Salvia miltiorrhiza Bge. 丹参 四川 Salvia miltiorrhiza Bge. 丹参 安徽 Salvia miltiorrhiza Bge. 野生丹参 山西 Salvia miltiorrhiza Bge. 1.3 样品处理与检测 1.3.1 FTIR无损鉴别不同产地的丹参 将各个产地的丹参药材用微型粉碎机粉碎,过190目筛, 于60℃烘15个小时。溴化钾于红外烘箱中烘一个小时。取药粉约5mg,溴化钾约250mg,置于玛瑙研钵中,研细后置于模具中,油泵加压,压力为10kg*1000,约20秒后取下模具,将制备好的溴化钾样品片置于红外光谱仪中,进行测试。 1.3.2丹参的硅胶柱层析分析 取一定量丹参，工业酒精水浴加热提取2h，提取液旋转蒸发近干，用乙酸乙酯溶解；湿法装小的硅胶柱，干法进样，依次用10％的乙酸乙酯石油醚溶液、30％的乙酸乙酯石油醚溶液、乙酸乙酯和无水乙醇进行洗脱，收集各个色带洗脱液，旋转蒸发近干，用一定量无水乙醇溶解，分别测定UV和IR光谱。 1.3.3 丹参的薄层色谱分析 取一定量丹参，加12 倍量蒸馏水加热提取2h。浓缩提取液后用1：1的HCl 调节PH到2，用水饱和的乙醚萃取， 醚提液挥去乙醚，用少量无水乙醇溶解。用苯：乙酸乙酯：甲醇（80：50：8）展开，紫外灯下收集不同Rf值的色带，用一定量无水乙醇溶解后，测定UV和IR光谱。 表2 各产地丹参红外吸收相似度 安徽 河北 湖北 湖南 山西 山西野生 四川 1 0.26559 0.16989 0.52296 0.5038 0 0.11917 0.26559 1 0.83582 0.72404 0.71954 0.70972 0.84037 0.16989 0.83582 1 0.63391 0.57987 0.8208 0.84517 0.52296 0.72404 0.63391 1 0.80682 0.47098 0.58418 0.5038 0.71954 0.57987 0.80682