农业微生物复习题.docVIP

显微镜的实用 调节光照 步骤：1.将低倍物镜旋到镜筒下方，旋转粗调螺，使镜头和载物台相距0.5cm左右。 2. 无菌操作 目的：微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但某些细菌的芽孢即使煮沸1~2h仍能存活，因此彻底灭菌需要更高的温度。 原理：蒸气的温度随压力的增加而提高，压力越大，温度越高。 构造：外锅，热源，内锅，压力表，排气阀，安全阀。 操作过程： 加水。加水量可从水位玻管处观察，至要求的水位刻度。 装锅。将待灭菌物品装入锅内，不要装的太紧太满，留有空隙以利蒸气流通。 盖上锅盖，按对称位置拧紧螺栓以不漏气为准。 加热。接通电源加热，手提式灭菌锅可放在电炉上加热，打开排气阀。 5.排尽冷空气。从排气阀开始有蒸气排出，计时15min，以彻底排尽锅内冷空气，然后关闭排气阀。 6.继续加热至所要求的灭菌温度（或压力），并维持15~30min。 7.切断电源，使其自然冷却，待压力退回“0”位时打开排气阀，然后方可打开灭菌锅盖。 8.取出锅内物品，若需放置斜面应立即摆好。 9.如灭菌锅长期不使用，将夹层水放出，保持锅内清洁。 思考题： 为什么加压的蒸气能提高灭菌效果？ 升温使蛋白质变性从而杀死微生物。 使用高压蒸汽灭菌应注意哪些事项？ 物品不要过多，加热后排除冷空气，到时降压回零取物。 革兰氏染色： 实验目的：认识细菌的基本形态及排列方式，掌握细菌的染色制片技术。 实验材料：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌 显微镜 草酸铵结晶紫染液 革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：1）涂片固定。 2）草酸铵结晶紫染1分钟。 3）自来水冲洗。 4）加碘液覆盖涂面染约1分钟。 5）水洗，用吸水纸吸去水分。 6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。 7）蕃红染色液（稀）染1分钟后，自来水冲洗。干燥，镜检。原理：紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。加塞不同的生物需要不同培养基,注意配方的选取,称取要准确,误差不能太大对于特殊物品,不能灭菌的要用过滤方法除菌配好后高温高压灭菌,可以在室温下放置很久,如果打开使用过一次,请放置冰箱如果长时间不用,一定要重新配置,不能拿以前的用来培养,避免污染。微生物农药：直接利用细菌、真菌和病毒等产生的天然活性物质或生物活体本身开发的，对植物病虫草害进行防治的农药。Ti质粒：根瘤土壤杆菌细胞中存在的一种独立于染色体之外能自我复制的环状双链DNA分子。 菌苔：细菌在固体培养基接种线上由母细胞繁殖长成的一片密集的、具有一定形态结构特征的细菌群落，一般为大批菌落聚集而成。? 质粒：是一类小型共价闭合环状核外DNA，能独立于细胞核进行自主复制。可通过交换掺入细胞核成为附加体 土壤团聚体:由土壤矿物质颗粒，微生物，植物残体以及腐殖质构成的微团聚体经过多次复合和团聚而成的结构。 光复活作用：把紫外线照射后的微生物立即暴露于可见光时，可明显降低其死亡率的现象 灭菌：采用强烈的理化因素，使任何物体内外一切微生物都永远丧失其生长繁殖的措施。消毒：采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部的一部分对人体有害的病原菌，而对被处理物体基本无害的措施。