糖化血红蛋白检测标准化及方法学进展.ppt

中国糖尿病现状 HbA1C参考系统的种类 1、国际临床化学协会(IFCC) 2、美国国家糖尿病标准化计划(NGSP) 3、日本的糖尿病协会/临床检验协会体系(JDS/JSCC) 4、瑞典的Mono-S IFCC 参考系统的建立 科学家 （欧洲-美国-日本-澳大利亚） IFCC 参考方法 欧 盟 一级参考实验室 IFCC参考方法流程（特异性检测） 2. 用Agilent HPLC进行酶切肽链粗品分离 HPLC* 3. 用质谱定量分离糖化和非糖化肽链 mass spectrometer* 1. 血红蛋白酶切 非糖化 (HbA0) N-端六肽 糖化 (HbA1c) N-端六肽 Process patented by Roche * Used in our Penzberg facilities 卫生部临检中心HbA1c室间数据（2013年）罗氏检测平台的室间CV为 2.5％和3.17％ Source: ngsp pt 2013 11% 11% 54% 24% 31% 67% 2% 免疫法 离子交换色谱 电泳法 亲和层析色谱 1995年 （889家） 2013年 （3240家） CAP HbA1c 室间比对用户方法学统计（2013.10）免疫法操作便捷、通量大、成本低，已成为国际的主流方法 Confidential * page * ? 2009 Roche 2013年9月4日必威体育精装版调查，之前2010年3月25日，杨文英《新英格兰》 14省，4.6万人群；9240万 9.7%；1.48亿15.5% 1994，2.5%，2000 5.5% 美国的国家糖尿病标准化计划 1 * 因为非特异性结合，不同国家检测标准，如美国NGSP，日本JDS，瑞典Mono-S对于同一个样本的检测结果各有不同，而IFCC采用为纯化合物的特异性检测，统一并标准化了检测结果。 （左上图）DCCT实验的谱图中，可以看出HbA1c和LA1c没有实现基线分离。色谱分析，取决于分析柱的分辨率，（右上图）所以NGSP结果比JDS和Mono-S都高。 1 * 原理的区别，NGSP根据色谱峰定义HbA1c，色谱峰取决于带电荷数量，即带电数量相似会同时被洗脱。而IFCC是根据化学结构定义并纯化后的特异性检测。 1 * 《指南》中明确了IFCC参考系统的唯一性及NGSP和IFCC的溯源关系 1 * 免疫法是CAP美国病理家学会HbA1c室间比用户的主流方法。从1995年11％上升到2013年67％的用户。 1 * * * 可参考 一年两次的PT实验信息 1 之所以罗氏公司作为首家通过FDA认可的诊断产品公司，原因在于510（k）文件，除了评估正确性，精密度之外，必须检测变异体对结果的要求，而罗氏HbA1c检测试剂对变异体识别具有显著的优势。 1 * 因为特异性检测，保证了抗干扰能力。识别HbA1c－6肽氨基酸 * 1 糖化血红蛋白检测标准化及方法学进展 哈尔滨医科大学附属第四医院检验科 梁红艳 中国糖尿病现状1.14亿糖尿病患者，4.93亿糖尿病前期人群 (2010年调查结果，根据2010年ADA糖尿病诊断标准) 背景： CDC和上海内分泌研究所慢性流行病调查 覆盖全国31省，98658成年人群 在成年人群中，糖尿病患者11.6%，前期人群 50.1% IDF=International Diabetes Federation 重要变革：2010年ADA糖尿病诊治指南增加糖化血红蛋白 (HbA1c)≥6.5%作为糖尿病的诊断标准 source： HbA1c标准化的目的 电荷差异 离子层析法：HPLC 电泳法 结构特异性 免疫法 亲和层析法 标准化 不同方法测定 结果具有可比性 HbA1c检测标准化进程确认 IFCC 参考系统是检测“金标准” 1985年 DCCT（糖尿病控制和综合征研究试验） 目的：评估了严格控制血糖对预防糖尿病人的慢性并发症的重要意义。 1993年 NGSP(国家糖化血红蛋白标准化计划） 目的：对HbA1c检测结果标准化，以使临床实验室的检测结果和DCCT的结果有可比性。 1995年 IFCC（国际临床化学学会）HbA1c标准化工作组，2002年完成参考系统建立。 目的：确定HbA1c检测的国际标准化 2010年 ADA/EASD/IDF/IFCC 国际共识 确认IFCC参考系统为全球HbA1c标准化唯一系统  各国糖化血红蛋白标准化计划同一个样本，结果差异大 瑞典 美国 NGSP和IFCC的区别 HbA1c国际标准化IFCC建立最高溯源标准 HbA1c NGSP缺乏统一公认的标准物质和参考方法。 制备高度纯化的一级标准物质 明确定义HbA1c 建立特异性检测HbA1c