实验4根系活力的测定(ttc).ppt

实验4 根系活力的测定[TTC法] 一、实验目的 H2O 无机盐 合成氨基酸和植物激素（ABA、CTK、GA等） 根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量 测定根系活力，为植物营养研究提供依据。 理解植物根系活力的内涵 掌握根系活力测定的原理与方法 二、实验原理 氯化三苯基四氮唑（TTC）是标准氧化电位为80mV的氧化还原物质，溶于水中成为无色溶液，但还原后即生成红色而不溶于水的三苯基甲腙 （TTF）。 生成的TTF比较稳定，不会被空气中的氧自动氧化 TTC TTF 根系活力 脱氢酶 丙二酸 碘乙酸 琥珀酸 延胡索酸 苹果酸 促进 抑制 （无色，溶于水） （红色，不溶于水） 三、实验材料 水培小麦根系 四、实验步骤—制作TTC标准曲线 吸取0.25mL TTC加入10mL容量瓶 Na2S2O4 加少许Na2S2O4 乙酸乙酯 乙酸乙酯定容至10ml 0.25mL 0.50mL 1.00mL 1.50mL 2.00mL TTC含量（μg） 25 50 100 150 200 乙酸乙酯作参比，测定485nm下光密度值，绘制标准曲线 乙酸乙酯定容至10ml 四、实验步骤—测定根系活力 0.5g根尖样品 0.4％TTC和磷酸缓冲液的等量混合液10ml 根充分浸没于溶液中 37℃下暗保温1～3h 加入1mol/L硫酸2ml 取出根吸干水分 与3～4ml乙酸乙酯和少量石英砂在研钵内磨碎 红色提取液移入试管且用乙酸乙酯定容到10ml 空白试验作参比测485nm下吸光度 与此同时做一空白实验，先加硫酸2ml，再加根样品，其他操作同上 查标准曲线，求四氮唑还原量 五、实验结果 ＝ 四氮唑还原强度 （mg/g(根鲜重)/h） 四氮唑还原量（ μg ） [根重（g）×时间(h)] 六、思考题 1.植物的根与地上部分有何关系? 2.测定根系活力时最好选择根的哪个部位？为什么？ * 刘国华 * TTC被广泛地用作酶试验的氢受体，植物根系中脱氢酶所引起的TTC还原，可因加入琥珀酸，延胡索酸，苹果酸得到增强，而被丙二酸、碘乙酸所抑制。所以TTC还原量能表示脱氢酶活性并作为根系活力的指标。 * 在幼根中，脱氢酶活性的强弱与根系活力成正比。所以，通过测定脱氢酶的活性，可由脱氢酶活性代表根系活力。 * 刘国华 * TTC被广泛地用作酶试验的氢受体，植物根系中脱氢酶所引起的TTC还原，可因加入琥珀酸，延胡索酸，苹果酸得到增强，而被丙二酸、碘乙酸所抑制。所以TTC还原量能表示脱氢酶活性并作为根系活力的指标。 * 在幼根中，脱氢酶活性的强弱与根系活力成正比。所以，通过测定脱氢酶的活性，可由脱氢酶活性代表根系活力。