酶联免疫分析方法在动物源性食品安全检测中应用.pdfVIP

2010年第三届国际食品安全高峰论坛论文集 165 酶联免疫分析方法在动物源性食品安全检测中的应用 周若兰 北京阿匹斯生物技术有限公司 摘要：本文对酶联免疫分析方法在动物源性食品安全检测中的应用进行了综述，主要包括：兽药残留、有害微生物、 真茼毒素、动物毒素、动物疫病的检测，并概括了该方法在动物源性食品安全检测中的应用前景和发展趋势。 关键词：酶联免疫：动物源性食品；兽药残留 。 随着食品工业的快速发展和食品贸易的日益全球 体(又称二抗)与上述复合物结合，此时加入底物，复 化，食品安全已成为全球共同关注的焦点。我国食品安 合物上的酶则催化底物而显色，由于每步之间均有冲洗 全法的出台，意味着食品安全已经不再是一般的质量问 步骤，因此，若样品中不含相应的抗体，酶标抗体则将 题，不仅关系着人类健康，而且影响着国民经济发展。 被洗掉，底物不显色而呈阴性反应若样品中含相应的抗 其中，动物源性食品(肉、蛋、奶、水产及其制品)安 体，底物显色而呈阳性反应。(2)双抗体夹心法测抗原： 全尤其引人瞩目，由于生长链长，通过食物链的生物富 将已知的特异性抗体包被在固相载体上，形成固相抗体， 集或外源性污染使有毒有害物质残留，从而引起人类的 加入待检样品(含相应抗原)，其中抗原与固相抗体结合 食源性中毒。 成复合物，再加入特异性的酶标抗体，使之与已形成的 欧美等发达国家对动物源性食品安全问题十分重 抗原．抗体复合物结合，当加入底物时，酶则催化底物而 视，通过制订严格的限量标准和检测方法，限制其他国 显色，根据颜色的有无和深浅对待测抗原进行定性和定 家残留超标的动物源食品进入，食品安全领域技术性贸 量分析。(3)竞争法测抗原：将特异性抗体与固相载体 易措施已成为动物源性食品进入发达国家市场的首要非 联结，形成固相抗体，加入待测样品(含相应抗原)和 关税壁垒。 相应的一定量的酶标抗原，样品中的抗原和酶标抗原竞 目前动物源性食品安全检测的常用方法有高效液相 争与固相抗体结合，待测样品中抗原含量越高，则与固 色谱法(HPLC)、气质联用法(GC．MS)、液质连用 相抗体结合的越多，使得酶标抗原与固相抗体结合的机 (LC．MS)等仪器分析法和酶联免疫分析法(ELISA) 会就越少，甚至没有机会结合，这样加入底物后就不显 以及微生物法。仪器分析法的缺点是样品制备耗费时间 色或显色很浅，显色深者为阴性。 长，检测设备昂贵，对检测人员的技术水平要求很高， 前两种方法主要用于测定抗体和大分子抗原，适用 因此不适合于日常较大量或大量样品的筛选检测。酶联 于临床诊断上，而竞争法是测定小分子抗原的方法，因 linked immtmosorbent 而尤其适用于食品安全检测。由于食品安全检测需测定 免疫分析法(enzyme assay，简称 ELISA)作为一种最常用的非均相酶免疫分析法，具有的物质大都为低分子量，免疫动物产生抗体的抗原分子 成本低、速度快、灵敏度高、仪器设备简单、操作较容 量必须大(至少50000u)，因此，必须将小分子物质与高 易的特点，适合于大量样品的快速筛查。20世纪90年代 分子蛋白质结合，才能作免疫之用。竞争法按实验操作 末期，ELISA技术不断发展以及全自动酶标分析仪的应步骤的不同又可分成直接竞争法和间接竞争法。 用，使其特异性与灵敏度有很大提高，在食