免疫胶体金技术的研究进展.pdfVIP

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会 四、试验总结 l、绝大多数的有害菌对益生菌的发酵代谢产物都是高敏感的，而对PH为3的发酵代 谢产物基本上菌高敏感。 2、乳杆菌、乳酸菌在通过16小时的混合培养，大肠杆蓖的量均在下降，24小时后各 益生菌均为优势菌群，而大肠杆菌成为劣势菌群。试验结果显示嗜酸乳杆菌的作用效果好于 鼠李糖乳杆菌，并且两种益生菌对大肠杆菌均有很强的抑制作用。 3、通过试验疗效、治愈时闯、治愈率等综合指标的观察评判，治疗4号的效果极显著， 其次为治疗为治疗2，治愈时间为2—3天，治愈率为100％； 4、疗效彻底。用后无反复发作； 5、降低应急，维持动物生产性能的持续提高； ． 6，帮消化，降低了动物因更换饲料而带来的肠道应急．减轻了因消化不良而引起的动 物过料现象I 7、促吸收，提高了动物豹被毛光亮度。 免疫胶体金技术的研究进展 刘薪鑫，丁社·，尹仁福。邱蜜蜜，捌美 (吉林大擘预防善匾擘固搴重点学科动物重要藕原与疫病研究宣，吉棒长春130062) 一、胶体金的发现 1857年．法拉第用还原法从氯金酸水溶液中制各胶体金，并发现在其中加入少量电解 质后，可使胶体金由红色变为蓝色，最终凝集成无色-而加入明胶或其他大分子物质便可阻 wP 止这种变化．他的重大发现奠定了胶体金制备和应用的科学基础。直至1971年F锄lk 大会报告与文献综述部分 等将胶体金引入免疫化学。此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法，在生物医学领域 应用免疫金技术检测B淋巴细胞表面抗原，建立了光镜水平的免疫金技术(IGs)。DarIscher 在此基础上改进并发展了用银显影液增强光镜金颗粒可见性的免疫金染色法tIGss)。 性腺激素mcG)的凝集试验，1985年起有商品试剂盒供应，从此胶体金成为免疫学测定方法 研究开发的新热点，新的方法和试剂盒层出不穷． 二、原理 免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技 术。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下， 聚合成为特定大小的金颚垃，并由于静电作用成为一种稳定的胗体状态，称为胶体金。胶体 金在弱碱环境下带负电荷，可与器自质分子的正电荷基团形成牢固的结合，由于这神结台是 静电结合，所以不影响蛋白质的生物特性。 胶体金除了与蛋白质结合以外，还可以与许多其它生物大分子结合．如sPA、PHA、 ConA等。根据胶体金的一些物理性状，如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应，加上 结合物的免疫和生物学特性，因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生 物学等领域。 三、胶体金的制备 以柠檬酸钠和单宁酸做还原荆，能够制各大小相对一致、直径3～16啪的胶体金。因 此一般胶体金探针均使用该方法进行．但该方法制备的胶体金粒子直径范围较窄，而且残留 的多聚单宁酸残基往往干扰某些蛋白与金粒子的结合。此时在溶液中添加O．1～0．2％的H202 能够去除这些残基。双标记或制备5．10m的胶体金时建议使用该方法。 利用柠檬酸为还原剂，可以制备12～150nm直径的胶体金。但制备大体积的胶体金时。 胶体金粒子的误差也同时增加。因此做单标记时，建议使用该方法制备12-16砌直径的胶 体金。除了上述方法外，也可以用磷作为还原剂来制备5劬的胶体金，它避免了单宁酸残 基的问题，但所形成的金粒子体积变化较大。磷易燃且有毒，制各的残液需进一步处理，故 该方法已经很少使用。 四、免疫胶体金分类 且前医学检验中应用的免疫胶体金快速检测技术主要有CGEIA和DIGFA两种方法。这 两种方法都是以微孔滤膜为载体，包被已知抗原或抗体，加入待检标本后，经滤膜的毛细管 作用或渗滤作用使标本中的抗原或抗体与膜上包被的抗体或抗原结合，再用胶体金结合物标 记而达到检测目的。 (一)DIGE^ 特性、渗滤装置独特的设计以及胶体金作为标记物的种种优点，使得抗原或抗体不仅能与膜 上的抗原或抗体快速结合，还能有效的浓集于膜上加快免疫反应，胶体金瞬时显色报告检测 结果。该方法特别适合于抗体的检测。