SRAP反应体系的优化及其在白簕品种间亲缘关系分析中应用.pdfVIP

园艺学报2011，38(增刊)：2639 http：／／WWW．ahs．ac．cn ActaHorticulturaeSinica 26．com E-mail：yuanyixuebao@1 SRAP反应体系的优化及其在白筋品种间亲缘 关系分析中的应用 雪1 林春华1，，李兆龙2，乔燕春1，林伟君3，刘自珠1，谭 技情报研究所，广州510640) 白筋[Acanthopanax 五加科(Araliaceae)攀援状灌木。白筋为民间常用草药，有舒筋活络、祛风除湿、理气、止咳之 效。目前国内外对白筋的研究重点在其化学成分和活性分析方面，有关种质资源收集、引种、鉴定 和利用等研究鲜有报道。本研究中通过优化SRAP反应体系，对白筋材料的遗传多样性及亲缘关系 进行分析，以期为白筋种质资源的保存、优良品种纯化以及杂交育种等工作提供参考依据。 分别从田间生物学性状和分子基因遗传水平两方面入手，对7份白筋材料进行了观察和分析。 研示范基地进行表型调查记录。挑选其幼嫩叶片，改良CTAB法提取白锄基因组DNA；采用优化 的SRAP反应体系对基因组进行处理，用99个S黜”引物组合对材料的多态性进行筛选，数据采 用NTSYS2．1软件处理，应用非加权类平均法(UPGMA)进行聚类分析，建立聚类图。 mmol·L-1 mmol·L1dNTPs，3 SRAP检测的25此反应体系：4 M92+，3 lamol-L．1引物，20ng模 U 板DNA，1．5 DNA聚合酶。从99组SRAP引物组合中筛选出17个多态性较好的组合对7 Taq 份材料进行分析，共扩增到461条谱带，其中多态性谱带155条，多态性谱带比率为33．6％，不同 引物的扩增条带为7～12条，平均每个引物组合产生10个多态性条带。 根据SRAP扩增结果，计算各品种间的遗传相似系数。结果表明：这些材料间的遗传相似系数 的变化范围是0．7077～0．9474，其中嫩芽呈红绿色的紫柄品种和嫩芽呈绿色的细叶密刺品种的相似 系数最小(0．7077)，亲缘关系最远；嫩芽呈红绿色的大叶大刺和红梗品种之间相似系数最高 (0．9474)，亲缘关系最近。 UPGMA聚类分析结果表明，所检测的7个白镯j品种分为二大类群，第一类群又分为2个亚类。 白梗镯5菜、细叶小刺筋菜、紫柄筋菜、大叶大刺镯i菜和红梗筋菜，聚成一组，其中自梗j65菜和细叶 小刺筋菜为一个亚类，紫柄筋菜、大叶大刺筋菜和红梗筋菜为第二亚类；青梗筋菜和细叶密刺筋菜 聚成了另一组；这些材料嫩芽颜色从下往上分别为绿色、红绿色和浅绿色，由此可知它们的分类依 据是白筋嫩芽颜色的深浅。 关键词。白鳓；SRAP反应体系；优化；亲缘关系 中图分类号lS6 文献标识码lA 文章编号：0513．353X(2011)S-2639．01 收稿日期l201l一07—28 ■盒项目t广东省科技攻关项目(20088021500011)；广东省教育部产学研结合项目(20108090400492) ‘E-maih Te020 chunhuagz(．蛰163．cornI