宁动颗粒对抽动秽语综合征模型大鼠纹状体5-羟色胺代谢及其受体影响.pdfVIP

实验研究 宁动颗粒对抽动秽语综合征模型大鼠纹状体 5一羟色胺代谢及其受体的影响 赵林1，李安源1，齐芳华1，王志学1，吕红2，李继君3 (1．山东大学附属省立医院，山东济南250021；2．滨州医学院中医学教研室，山东烟台264003； 3．上海交通大学医学院附属儿童医学中心，上海200127) 摘要：目的：探讨宁动颗粒对抽动一秽语综合征(Ts)模型大鼠纹状体5一羟色胺(5一m’)代谢及其受体5一HT：。受体(5一 HT2。R)的影响，以探讨宁动颗粒治疗偈的作用机制。方法：将64只大鼠随机均分为空白对照组、模型组、宁动颗粒低剂 量组、宁动颗粒高剂量组，通过阿朴吗啡(Apo)腹腔注射法建立鸭模型。宁动颗粒低、高剂量组分别给予宁动颗粒1．89／ 用免疫组化法检测纹状体5HT2．R表达，酶联免疫吸附法测定大鼠纹状体5一册、5一ttlAA含量。结果：与空白对照组比 vs 较，模型组大鼠纹状体5一HT2^R蛋白表达(143．10±8．01 论：Apo诱导的tIS大鼠纹状体存在5一}lT递质系统功能增强，但其功能增强仍相对不足；宁动颗粒可抑制5一I-IT代谢，上 调髑大鼠纹状体内5一HT2．R蛋白表达和5一HT含量，改善纹状体内5一HT递质系统功能活动相对不足。 关键词：宁动颗粒；抽动一秽语综合征；5一羟色胺代谢；5一Hk受体 抽动一秽语综合征(Tourette’ssyndrome，TS)是一种以无意识的、无目的的、反复的运动性或声音性 抽动为特征的慢性神经精神性疾病。发病机制尚不明确，临床治疗颇为棘手。中枢神经递质失衡在Ts 发病过程中的起着重要作用，特别是纹状体多巴胺(Dopamin，DA)递质系统功能过度活跃和5一羟色胺 (5一HT)递质系统异常与髑的发病及病情发展密切有关。我们临床研究显示，宁动颗粒可以有效改善 Ts抽动症状以及伴发的强迫症状。动物实验表明，宁动颗粒可以抑制，Is大鼠模型纹状体DA系统活性， 但对5一HT系统的影响尚不明确。本研究旨在观察宁动颗粒对髑模型大鼠纹状体5一HT递质系统的 影响，以进一步探讨宁动颗粒治疗喝的作用机制。 1材料与方法 ， 1．1实验动物 (鲁 1．2药品与试剂 1．2．1宁动颗粒(NDG)药品组成及制备过程 龙；(viii)甘草。以上8种药物比例：2：3：2：4：5：5：2：2。由山东省中医药研究院制备成颗粒剂。 1．2．2试剂 R)多克隆抗体：编号ab66049，美国Abc哪公司产品。二步法抗彩鼠通用型免疫组化检测试剂盒：基因 ．529． 中华中医药学会儿科分会第三十一次学术大会暨儿科名中医学术经验传承讲习班论文汇编 号：E1005Ra。 1．2．3复制模型 根据我们前期报道的造模方法复制大鼠模型。将大鼠编号随机分为4组：空白对照组、模型组、宁动 颗粒低剂量组、宁动颗粒高剂量组，每组各16只。正常对照组腹腔注射生理盐水3 ml／(kg·d)，其余3 2．0 组腹腔注射Apo 15min后开始观察大鼠刻 mg／(kg·d)。连续注射4周。造模第4周，每次注射Apo 板活动。 1-2．4药物干预 白对照组及模型组分别给予等量蒸馏水。各组大鼠均灌胃给药，每日9：00和16：00分别给药1次，连续 给药12周。 1．2．5应用免疫组化法检测纹状体5HT,AR表达 药物干预12周后处死每组8只大鼠，处死前一天禁食，不禁水。麻醉后，打开胸腔暴露心脏，用9# 针头从心尖插人左心室，直至升主动脉，止血钳固定，剪开右心耳。灌注室温生理盐水，至右心耳流出澄 清液体。然后用4％多聚甲醛0．1M磷酸盐缓冲液300ml灌注，直至四肢僵硬、尾巴僵硬无色直起为止。 位纹状体)。取纹状体在4％多聚甲醛中固定24h。取固定标本制备组织切片。每组选择8张切片进行 免疫组化染色，主要步骤：石蜡切