蛇床子素、补骨脂素、丹皮酚配伍对乳腺癌MDA-MB-231BO细胞株的体外抑制及TGF-β1基因表达影响.pdfVIP

第十三届全国中医及中西医结合乳腺病学术年会论文集·2013年·上海 通路与溶骨性转导通路OPG／IlANK瓜ANKI之间可能存在某些关系，为下一步的 实验提供了一定的思路。 蛇床子素、补骨脂素、丹皮酚配伍对乳腺癌皿A—船一23180细胞株的 1基因表达的影响 体外抑制及TGF—p 郭保风1，刘胜：I：，叶依依1，韩向晖1 1上海中医药大学附属龙华医院中药药理实验室，上海200032 【摘要】目的探讨蛇床子素、补骨脂素、丹皮酚对人乳腺癌骨高转移细胞株 MDA—MB一231BO细胞株的体外增殖及侵袭作用的影响，并初步探讨其作用机制。 方法采用均匀设计实验方案进行组方设计；MDA—MB一23180细胞体外侵袭实验， 实时荧光聚合酶链反应(RT—PCR)，观察药物处理后细胞的侵袭情况及对人转化 1)基因的表达情况。 生长因子一p1(TGF-B 结果获取蛇床子素、补骨脂素、丹皮酚三个药物的最佳配伍比例为10．00：7．78： 6．67；单体组和阳性药物组在体外作用24小时后，可以显著抑制MDA—MB一231BO 细胞的侵袭(P0．05)。结论中药单体组蛇床子素、补骨脂素、丹皮酚对乳腺癌 MDA—MB一23lB0细胞的生长具有抑制作用，有效抑制其侵袭和转移，其机制可能 1基因的表达有关。 与抑制TGF—p 【关键词】蛇床子素；补骨脂素；丹皮酚；乳腺癌骨转移 引言 乳腺癌隶属中医学“乳岩”、“乳疳”、“石奶”、“翻花奶”、“奶岩”等范畴。 它是女性常见的恶性肿瘤之～，发病率占全身恶性肿瘤的7％一10％，晚期会发生 骨转移的比例高于80％，表现骨性疼痛和病理性骨折。如何预防及减少乳腺癌骨 转移的发生，成为当今国内外研究的热点。 在中医理论指导下，现代人医家对癌性疼痛的认知颇多[1]。笔者导师在长 年的临床工作中发现祖国医学中补骨脂、蛇床子配伍徐长卿对乳腺癌骨转移有很 好的抑制作用，能够减轻患者骨节的疼痛。现在药理实验也证实了补骨脂、蛇床 第十三届全国中医及中西医结合乳腺病学术年会论文集·2013年·上海 子、徐长卿其有效成份补骨脂素、蛇床子素、丹皮酚均有抗肿瘤的作用，有文献 报道蛇床子素对于乳腺癌细胞MCF一7和MDA—MB一231细胞株有不同程度上的抑制 作用[2—3]，蛇床子素通过调节Akt／mTOR通路，抑制脂肪酸合酶，从而对HER2 过表达的乳腺癌细胞有抑制作用[4]，体外实验证实补骨脂素对乳腺癌细胞MCF一7 有抑制作用[5]，丹皮酚也已经用于食管癌的研究[6]。 我们前期实验已经从体外实验证明中药蛇床子和补骨脂配伍对于乳腺癌骨 高转移细胞株MDA—MB一231BO有抑制作用[7]，体内实验证明能显著性抑制由 MDA—MB一23lB0诱导的乳腺癌骨转移裸鼠的骨转移[8]。但对于三个单体联合应用 抗乳腺癌骨高转移细胞株MDA—MB一231BO的效果如何，其抑制作用的机制如何， 我们进行了一系列的实验。 l、材料与方法 1．1研究材料： 1．1．1细胞来源： 人乳腺癌骨高转移细胞株MDA—MB一231BO由美国德克萨斯州立大学医学系 内分泌所ToshiyukiYoneda博士惠赠，细胞复苏后，培养于DMEM培养液(含双 抗)中，内加10％胎牛血清，培育在37℃，5％CO。的培养箱中。 1．1．2主要材料与仪器： 补骨脂素、蛇床子素、丹皮酚均购于南京泽朗植提(批号分别是 modificationof 限公司)；达尔伯克改良伊格尔培养基培养液(Dulbecco’s medium Eagle’s buffer 蛋白酶，美国Gibco公司产品；磷酸盐缓冲液(phosphatesolution，PBS)， 吉诺生物医药技术有限公司产品；胎牛血清，杭州四季青生物工程材料有限公司 产品；二甲基亚砜(Dimethyl 基 四 氮 唑 溴 盐 (