高效液相色谱法测定葡萄叶中5种芪化物.pdfVIP

第36卷 分析化学(FENXIHUAXUE)研究简报 第lO期 Chinese of 1359—1363 2008年lO月 Journal AnalyticalChemistry 高效液相色谱法测定葡萄叶中5种芪化物 王琴飞1’2 马丽艳1 黄绵佳2 王蕾1 罗葵1 李景明“1’’ 1(中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京100083)2(海南大学园艺园林学院，儋州571737) 摘 要 1antis himx4．6 C18色谱柱(250 mill，5¨脚)，流动相为乙腈、水梯度洗脱，二极管阵列检测器，检测波长为306 Ilia；流速1mL／min；柱温30℃，外标法定量。结果显示：5种芪化物的线性关系良好。相关系数在 0．05 mg／L。本方法前处理简单、快速。应用本方法测定了葡萄叶片紫外诱导后5种芪化物的含量变化，结果 令人满意。 关键词白藜芦醇，云杉苷，葡萄素，紫檀芪，高效液相色谱，葡萄叶 1 引 言 Res)及其衍生物是一类重要的生理活性多酚物质。在植物抗病性…、人类心血管疾病和癌症预防B1等 方面都表现出优异的特性。因而受到越来越多的植物生理、植物病理、转基因育种以及医药学及功能食 品开发领域的关注。白藜芦醇最早是作为一种植物抗毒素被发现并研究的【3J，但在其后多年研究中始 终局限于植物病害防治领域，直到1997年Jang等M1研究了红葡萄酒中自藜芦醇在抗癌方面的良好作 用和潜力后，才得到了广泛应用。随后的深入研究发现，葡萄为了抵御真菌、紫外线等逆境胁迫，不仅合 stilbene，Ps)等其它几种芪化物¨，5’6o(图1)。由于不同的芪化物对霜霉的抗性不同，在育种学方面，通过 测定霜霉侵染后葡萄叶片中芪化物的含量，可作为鉴定该葡萄品种的抗病性和缩短育种时间的依据o7|。 而在抗炎、抗菌、抗癌、抗氧化、预防心血管疾病方面，上述芪化物已被证明具有与Res相似的活性【8】，甚 至比Res的活性还高怕’9J。因此白藜芦醇等芪化物研究是近年来少见的多学科的交汇点、热点问题。 近年来对芪化物的检测分析主要集中在Res和PD的定性、定量方面，检测方法主要有气谱一质谱法 析【ln”J。芪化物在植物组织中的含量很低，利用HPLC同时对多种芪化物进行检测时常受到植物多酚 的干扰，样品需要进行圊相萃取等前处理【16,17]。但是芪化物见光容易发生顺式转化，因此，采用直接进 样的方法最为可靠易行。但是针对多种芪化物直接进样同时分析的方法还很少报道MJ，也有研究者采 用高效液相色谱切换波长法同时测定葡萄组织中多种单体酚¨8。。 本实验采用超声处理辅助提取、HPLC直接进样梯度洗脱的方式，建立一种快速提取、检测方法，实 现葡萄叶片中自藜芦醇等5种芪化物同时检测的目的。 2 实验部分 2．1仪器与试剂 Alliance (PDA，waters公司)。 2008-02．1 7收稿；2008-05-08接受 本文系国家自然科学基金(No资助项目 }E—mail：wangqfS08@163．corn 万方数据万方数据 1360 分析化学 第36卷 簦H。《…堪黧0“诤。H A B C D E 图1葡萄叶片中5种主要的芪化物 stilbenesin leaves Fig．1Key grape (占-vinifefin)。 甲醇和乙腈(色谱纯，Fisher公司)，超纯水。 2．2色谱条件 mm×4．6 色谱柱Atlantis mm，5 C1s(250 Ixm，Waters公司)。采用二元梯度洗脱，流动相A为乙 腈，B为水。起始为1％A，99％B，保持5min；到28 B为15％，保