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口蹄疫病毒P1+2A基因在BHK-21细胞中的表达【荐】.pdfVIP

口蹄疫病毒P1+2A基因在BHK-21细胞中的表达【荐】.pdf

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口蹄疫病毒P1+2A基因在BHK-21细胞中的表达【荐】.pdf

第 21 卷 5 期 中 国 病 毒 学 21 (5 ):454-457 2006 年 9 月 VIROLOGICA SINICA September 2006 口蹄疫病毒P1+2A 基因在 BHK–21 细胞中的表达* 龚真莉,刘湘涛** ,田 宏,吴锦艳,代兴国,尚佑军,陈国栋 (中国农业科学院兰州兽医研究所农业部畜禽病毒学重点实验室,甘肃兰州 730046 ) Expression of FMDV P1+2A Gene in BHK-21 Cells ** GONG Zhen-li,LIU Xiang-tao ,TIAN Hong,WU Jin-yan ,DAI Xing-guo , SHANG You-jun,CHEN Guo-dong (Key Laboratory of Animal Virology, Ministry of Agriculture Lanzhou Veterinary Research Institute, Lanzhou 730046,China) Abstract: In this study, recombinant expression plasmid pQE-Tri/P1+2A was constructed and then transfected into BHK-21 cell line mediated by liposome 2000. The results of SDS、 Western-blotting 、fluorescence antibody and ELISA showed that FMDV P1+2A protein was expressed in BHK-21 cell line successfully and can be recognized by FMD positive serum. The result will lay a foundation for study of FMDV gene engineered vaccines as well as the development of diagnostic reagents. Keywords: Foot-and-mouth Disease Virus; P1+2A gene; Expression vector: pQE-Trisystem; BHK-21 Cells transfection 摘要:本研究将已构建好的、包含口蹄疫病毒P1+2A 基因的重组表达质粒 pQE-Tri/P1+2A 经质脂体 2000 转染哺 乳动物细胞 BHK-21 ,转染后一定时间进行检测。通过 SDS、Western-blotting 、荧光抗体染色、ELISA 等 检测方法表明,FMDV P1+2A 基因片段在 BHK-21 细胞中成功表达,表达的蛋白能被口蹄疫阳性血清所识别而且 具有良好的生物学活性。这一结果的取得,为进一步研制新型口蹄疫基因工疫苗及其配套诊断试剂奠定了基础。 关键词 :口蹄疫病毒;P1+2A 基因;表达载体 pQE-Trisystem ;BHK-21 细胞转染 中图分类号:S852.65 文献标识码:A 文章编号 :1003-5125(2006)05-0454-04 口蹄疫(Foot-and-mouth disease, FMD)是由口 困难[5,6] 。而目前又频繁出现传统疫苗免疫失败的现 蹄疫病毒(Foot-and-mouth dis

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