复发性口腔溃疡动物模型改进.pdf

中华 口腔医学杂志 1994年 9月第 29卷第 5期 290 · ，／ 复发性 口腔溃疡动物模型改进 I 王兰君R? ， 土f． ^摘要 本实验应用动物的II腔粘膜、心脏、肝脏组织及提取II腔粘膜蛋 白质分别作为抗原，通过 免疫学技术 ，诱导兔产生II腔粘膜病掼 其体征、组织学变化、血清中抗 口腔粘膜抗体检测及免疫荧光 抗体检测等观察结果 ，说明 口腔粘膜的组织匀浆和粘膜蛋白质作为抗原，均 可弓f起 口腔粘膜 溃疡病 损 ，进一步证实这种方法可作为』、类RAU 的动物模型。 关键词 复发性 口腔溃疡 动物模型 复发性 口腔溃疡 (RAu)的病因至今 尚不 (1)口腔粘膜蛋 白质提 取方法：以 6只家兔 ，剥取 明确，近年来多认为与免疫有关 。我们曾初步应 日腔粘膜组织 ，用 内切式匀浆器匀浆 ，超声波震荡 ，低 用免疫技术建立了复发性 口腔溃疡的动物模 温离心，保 留沉淀物 ，取上清液装入透析袋 内。透析 4 小时，冷冻干燥 ，获得粉末状蛋白质 型 。本实验应用正常家兔 口腔粘膜 ，心脏、肝 (2)免疫逾径及方法：将实验兔 15只分为三组 ，第 脏组织及提取口腔粘膜蛋白质分别作为抗原 ， ～ 组注射提取 口腔粘膜蛋白质 ，每次每只注射12．5mg， 并用免疫学的方法观察其组织特异性及抗原活 将 其溶 于 0．5mi磷酸缓冲液中，再加入 0．5ml的完垒 性。结果报告如下。 弗氏佐剂而呈乳化液 ，共注射 5次 。第二组注射 口腔粘 膜蛋白质提取过程中的沉淀物。第三组为对照组 ，注射 材料和方法 lml的磷酸缓冲液。 一 、 实验材料 结 果 1．家兔 ：雄性 ，体重 1．5～2kg，共 3j只。 2．冰冻组织切片 ：健康大 白鼠，切取 口腔、胃粘膜 一 、 实验 1 及 心脏 、肝脏组织，快速置液氮 中冷冻。SLEE恒冷切 1．口腔病损：于第三次注射抗原后 ，实验组 片机连续切片 、干燥 、备用。 家兔 口腔 内出现病损 。溃疡多发生在下唇和上 3．薄干羊抗兔 G荧光抗体 。 二、实验方法 唇 ，其次是牙龈和 口底粘膜 。开始局部粘膜充 1．实验 1：用不同组织抗原诱 导实验动物产生 口 血 ，继而发生溃疡，溃疡呈圆形或椭圆形，边缘 腔病掼。 较整齐，表面有一层黄色假膜覆盖。溃疡直径为 (1)实验分组 ：口腔粘膜组 、心脏组织组 、肝脏组织 2～5ram，一般 2～3天愈合。5只粘膜组家兔溃 组、对照组各实验动物 5只。 疡累计发作 104次。5只肝脏组溃疡发作 l3 (2)抗原制备 ：选用正常家兔 4只，急性处死，在无 次。5只心脏组溃疡发作 24次 而对照组未发 菌条件下制取 口腔粘膜组织 ，研磨成糊状 用同样的方 生病损。注射 口腔