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第三节 动物细胞工程..doc
第三节 动物细胞工程
【学习目标】
1、简述动物细胞培养的过程、条件及其应用
2、简述克隆动物的概念含义和基本原理
3、简述体细胞核移植技术和动物克隆技术,以及应用前景
4、简述动物细胞融合的方法和过程
5、简述单克隆抗体的制备过程及其应用
【课前预习】
一、动物细胞与组织培养
1、概念:是指在体外模拟动物体内环境,将动物的 在
的条件下培养,使其继续生长、增殖并维持原有结构和功能的技术。
2、条件:动物细胞培养的环境条件,包括 ;
动物细胞与组织培养的培养基,可分为 和 。
动物细胞与组织培养的细胞,一般为 、 或 。
二、细胞核移植与动物体细胞克隆
动物体细胞克隆:是将供体体细胞的 与受体 进行人工组合,借助于 的发育能力,经过培养发育成胚胎进而形成个体的技术。
细胞核移植技术:是一种利用显微操作技术将某种动物细胞的 移入 或
动物的 内的技术。
三、细胞融合和单克隆抗体
1、细胞融合概念:是指在一定的条件下将 细胞融合为 的过程。
2、诱导细胞融合的方法有: 法(如 )、 法(如 );和 法(如 )。
3、单克隆抗体制备:给小鼠注射特定的 ,从 中分离B淋巴细胞(即浆细胞)与 细胞融合,经培养,筛选出 细胞,使其在 或 培养,迅速增殖,分泌出 ,即为单克隆抗体。
【共同探究】
一、动物细胞与组织培养
1、概念:
2、动物细胞培养的过程:
【思考题1】为什么动物细胞要分散成单个细胞培养?用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗?
幼龄与老龄动物的组织细胞比较,分化程度低的与分化程度高的组织细胞比较,哪一种更易于培养?思考一下,这是什么道理?
,所以更容易培养。
动物细胞培养要经过脱分化的过程吗?为什么?植物的任何一部分,甚至单个细胞都具有长成完整植株的能力。但要发育成完整植株,必须先脱分化,脱分化的细胞具有发育成任何组织的能力,然后进行再分化,形成完整植株。①对培养液和所有培养用具进行无菌处理。(为什么?)
②营养(培养基)。根据营养物质的来源,一般将培养基分为 天然培养基 和 合成培养基 ;天然培养基主要取自 、 和 等;合成培养基是人工配制的,包括多种营养物质如 等,合成培养基中仍需加入动物血清,为什么? 。细胞外培养所需营养与体内基本 (相同、不同)。
定期更换培养液,以便 。
③环境条件:温度。一般与动物的 ,如哺乳动物多为 ℃。
pH。多数细胞生存的适宜pH为 。
气体环境。O2是 所必需的;CO2的主要作用是 。O2和CO2的含量不仅影响环境的 ,还直接影响 。
【思考题5】为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清?
【思考题10】用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞是
为了保证 。
用体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什么?
3、意义:
克服动物种间杂交障碍、创造新物种;大量复制实验动物;利用异种动物借腹妊娠挽救珍稀动物;利用患者自身的细胞培育新的组织或器官用于组织器官的移植。
【思考题11】下图为克隆羊“多利
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