牙鲆PoAkirin1相互作用蛋白筛选及基因性质地研究.pdfVIP

2011年中国水产学会学术年会论文摘要集 牙鲆PoAkirinl相互作用蛋白筛选及基因性质的研究 杨长庚1,2，王贤丽2，王磊2，张博2，文华1，陈松林2木 (1．中国水产科学研究院长江水产研究所武汉430223 2．农业部海洋渔业可持续发展综合性重点实验室，中国水产科学研究院黄海水产研究所，山 东青岛266071) 摘要：本文以牙鲆中免疫相关基因PoAkirinl为研究对象，利用荧光实时定量PCR及酵母 双杂交的方法开展了相互作用蛋白质筛选及相关基因的性质与功能的研究。首先克隆到 49个阳性克隆，获得了7个可能相互作用的基因。从中选择了2个可能与免疫相关或者是 蛋白预测后位于细胞核中的蛋白进行了酵母回转验证及分段验证，结果表明，这两个蛋白一 可能位于其N末端。通过荧光实时定量PCR检测细菌感染牙鲆的肝、脾、肾组织中PoAkirinl， PoClq以及PoHEPN的表达变化，结果表明这三种基因均受到外源病原物的诱导，通过其 响应时间的不同推测它们可能处于免疫信号转导途径的不同位置。 关键词：牙鲆；免疫相关基因；PoAkirinl；酵母双杂交；荧光实时定量PCR ThefunctionofPoAkirinland screeninginteracting ProteinswithPoAkirinlin olivaceus Paralichthys Wena， Chang—GengYanga，b，Xian-LiWanga，LeiWangb，BoZhangb，Hua Chena木 Song—Lin RiverFisheriesResearch Institute，Chinese Sciences，Wuhan，China，430223 (aYangtze AcademyofFishery bYellowSeaFisheriesResearch Institute，ChineseofFishery Academy Sciences，Qingdao，China,266071) Abstract：Inthis immune—relatedin the paper,PoAkirinl．thegenesflounder,wasstudied．By real．timePCRand andthefunctionalofthe screeningyeasttwo．hybrid。thescreening analysis relatedwithPoAkirinl werecarriedout．weclonedthe CDNA of gene full—length sequence PoAkirinlasthe to the totalof49 baitscreen PoAkirinl．Byusing interactingproteins．a positive were 7 were clones screened，and possibleinteractinggenes acquired．Twopossible t