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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十六届学术研讨会论文集 小鼠胚胎非手术移植方法 崔利芳，刘晓倩，李相运 (1．河北农业大学动物科技学院保定071001；2．河北省牛羊胚胎工程技术研究中心保定 071001) 引言 哺乳动物胚胎移植技术是实验胚胎学、遗传学、发育生物学研究中的一项重要技术，小 鼠胚胎子宫移植可分为手术法和非手术法，目前实验室最常用的是手术法移植。手术法胚胎 移植较为复杂，需要对小鼠进行麻醉，对动物损伤大，恢复慢，对术者手术技能水平也要求 较高；而非手术法胚胎移植简单易行，无需手术，节约时间，节约费用，对小鼠损伤小，不 (优化)。本研究对非手术移植器具和移植方法进行改进，大大提高了非手术胚胎移植的产仔 率。 材料与方法 受体为与假孕公鼠合笼见栓后2。5天的CD．1母鼠，所用胚胎为3．5天囊胚；胚胎移植器 具为外径O．7姗的玻璃毛细管与枪头连接，再接2．5微升的移液器，吸取胚胎总体积控制在2 微升以内，移植时将受体置于鼠笼上，使其前爪紧抓住笼子，用左手拇指和食指抓住小鼠尾 部抬高，其余三指向下按压小鼠背部。用直径4咖，长10姗的医用聚乙烯管做开膣管，插入 小鼠阴道最底部，在体视显微镜冷光源下明显可见暴露的子宫颈口。右手将吸有8．10枚囊胚 的2．5微升的移液器通过子宫颈口沿子宫颈缓慢推进到子宫即可。 结果 非手术法胚胎移植比手术法简单快捷，本实验共移植120枚胚胎，受体母鼠12只，胚 胎着床率80．9％，其中死胎率15．6％，产仔率与手术法相当，但非手术法产死胎数明显上升， 可能是由于子宫颈刺激以及子宫内膜损伤而破坏子宫内环境所造成，本研究经过改进的小鼠 非手术移植方法受胎率显著提高，可以代替手术法，值得推广应用。 讨论 非手术法胚胎移植方法大大缩短了胚胎移植时间，减少对受体母鼠的伤害，简化了胚胎 移植方法，但同时非手术胚胎移植过程中还有许多问题有待解决，如胚胎死亡率高、出生死 胎率高、子宫内膜易损伤、胚胎在移植过程中出现丢失以及子宫扎穿等现象，而且非手术法 不能确定胚胎移植的具体部位，也不能排除子宫感染等不宜作为受体的小鼠等情况，但经过 简单练习，非手术移植比手术移植更易掌握。 参考文献 【l】王培生，杨秀琴，荣瑞章小鼠早期胚胎移植技术的研究【J】．遗传．1980，2(5)：42-43。 TransferofMouse 【2]TammyDavis．Nonsurgical Embryos[J]．Bios．1981，52(3)：127—133． A．Green，ShannonBass，Brett deviceforthe and transcervical 【3]Michael T．Spear．A simplerapid transferofmouse eliminatestheneedfor and surgery post-operative embryos potential 2009，47：919—924． complications[J]．BioTechniques methodfor transferin 【4】L．MARSK，K．S．LARSSON．Asimple non·surgicalblastocyst mice[J]． Reprod．Fert．1974，37：393—398． Leo TransferofMouse 【5】Hsian-Jean Wang．Utero·Tubal Embryos[J] Chin,Chi·Kuang 1． genesis．2001，30：77—8 der de