食物中毒采样与检验13407.ppt

检验结果判定原则 以找到病原体或其毒力基因为最终结论 快速检测结果仅供参考 注意非病原检样与病原检样检出病原菌的一致性 判定原则 多数患者样本中检出的致病意义明确的细菌在其种类、生化、血清型、毒素型均一致时，可以报告 非病原检样与病原检样检出占有绝对优势的致病意义不甚明确的细菌（大肠杆菌、溶藻弧菌。。。）且细菌种类、生化血清型均一致，同时本次事件中非患者对照未检出时，应加做毒力、动物试验，阳性结果可以报告 判定原则 样本中检出致泻大肠杆菌、金葡时，一定要做肠毒素检测为最终结论 蜡样芽胞杆菌、产气荚膜梭菌必须计数105cfu/g以上 食物中毒检验重要的筛检试验 氧化酶 分辨革兰氏阴性杆菌中的肠杆菌科及弧菌科（氧化酶阳性）两类细菌 触酶 分辨葡萄球菌和链球菌 沙门氏菌 有动力（除鸡-雏沙门菌 ） 大多产硫化氢（除甲型副伤寒） 产酸大多产气（除伤寒、鸡-雏沙门菌 ） 靛基质- 蔗糖- 乳糖- 甘露醇+ 葡萄糖+ 符合肠杆菌科特征 初步生化:三糖铁（TSI） 现象 说 明 底层 黄色 葡萄糖阳性 红色或不变色 葡萄糖阴性 黑色 产H2S 气泡 产气 斜面 黄色 乳糖和（或）蔗糖阳性 红色或不变色 乳糖和（或）蔗糖阴性 沙门氏菌 血清凝集：A-F多价 O H1 H2 如生化结果为沙门菌属但A-F多价 阴性考虑 Vi 抗原遮蔽，煮沸后再凝 亚利桑那菌：迟缓发酵乳糖，延长平板培养时间 可能使A-F以外的沙门菌 可能是血清交叉凝集的柠檬酸杆菌 结果报告方式 A群：甲副 1,2,12;a B群：乙型副伤寒 1,4,5,12：b:1,2 鼠伤寒 1,4,5,12：i:1,2 C群：丙型副伤寒 6,7，vi: c: 1,5 猪霍乱6,7：c: 1,5 D群：肠炎沙门菌 菌1,9,12：g,m 伤寒沙门菌 1,9：vi: d 志贺氏菌 无动力，乳糖- （除宋内迟缓发酵乳糖） 不产硫化氢，产酸不产气（除F6） 靛基质多数阳性（宋内-） 甘露醇+ （痢疾志贺-） 如生化结果为志贺氏菌属，四种多价不凝 K抗原遮蔽，煮沸后再凝 EIEC 补充生化ONPG 产气试验等 志贺氏菌 宋内的R相，使用R相血清凝集 蜂窝哈夫尼亚菌，做大生化鉴定 类志贺邻单胞菌 动力 氧化酶试验 细菌革兰氏染色形态 常用快速检测技术 显色培养基 利用细菌专有酶进行快速筛选 沙门、金葡、大肠、弧菌、单增 等 3M测试片 细菌微量快速鉴定（手工API ）标准化，缩短检测时间 自动生化鉴定：AMS ATB BioLog 直接从标本中检测抗原——ELISA 放免分析（RIA)酶免分析（EIA) 化学发光（CIA) 生物发光 VIDAS 胶体金技术 细菌毒力基因快速检测 比细菌培养方法更可靠 ETEC LT(热敏毒素）ST（耐热毒素） EHEC VT/SLT 副溶：TDH 金葡：肠毒素 BAX IQ-Check 普通PCR 荧光定量PCR（实时、多重PCR） 常见食物中毒病原菌 病原菌 致病机理 特征食品 标本 沙门菌 组织侵袭 禽、蛋、肉 （交叉污染的进口物） 食品：血清分型培养 病例：血清分型培养 食品加工者：粪便、血清培养 副溶血弧菌 侵袭性肠毒素 海产品 食品／病例 埃希氏大肠菌 ⒈产毒大肠杆菌 肠毒素（ST LT） 生蔬菜 食品：培养和血清分型 病例：便培养、血清分型和肠毒素产生；侵袭性试验 ⒉。侵袭性大肠杆菌 组织侵袭 沙拉，水，奶酪 ⒊。肠出血性大肠杆菌（E.coli O157:H7和其它） 细胞肠毒素 VT 牛肉，生奶 蜡样芽孢杆菌 肠毒素 调味酱、米粉、布丁、香肠、肉块 食品：培养 病例：便培养 志贺菌属 组织侵袭 被感染的操作者污染食品，通常不是食传的 食品：培养和血清分型 病例／操作者：便培养和血清分型 常见食物中毒病原菌 病原菌 致病机理 特征食品 标本 耶尔森氏菌 组织侵袭，肠毒素 被感染的人或低等动物污染的食品 冷藏食品 食品：培养 病例：便，血培养，血清分型 操作者：便培养 动物：便，生病动物的尸检材料培养 霍乱弧菌Ｏ１群 体内生成的肠毒素 感染者污染的食物或从污染的环境获得 食品： 血清分型 病例 ，血清分型 霍乱弧菌非Ｏ１群 体内生成的肠毒素，组织侵袭 贝类 弯曲杆菌 不详 生奶，禽 食品／病例：选择培养基培 养，血清学分型 金黄色 葡萄球菌 外毒素 火腿／肉片／调味酱／奶油 食品：肠毒素检测 食品加工者：培养鼻孔、皮肤病变 病人：粪便、呕吐物 蜡样芽孢杆菌 生成的肠毒素 米饭 食物：定性培养 病例：粪便培养 产气荚膜梭菌 体