鱼类低温适应机制的研究：Ⅱ.驯化温度对草鱼与鲮鱼肌肉线粒体膜脂肪酸组成与胆固醇含量的影响.pdfVIP

维普资讯 华南农业大学学报 增刊 1991 45~49 J． s。uthC蛐 ^ ． Univ． 鱼类低温适应机制的研究 Ⅱ．驯化温度对草鱼和鲮鱼肌肉线粒体膜 脂肪酸组成和胆固醇含量的影响 曹永长 王祖熊 (中国科学院水生生物研究所，武汉) 摘要 采用气相色谱法和气相色谱 ／质谱联用法对不同温度鲥养的草鱼和鲮鱼肌肉钱粒体虞脂 肪酸组成进行了分析．10．c适应的草鱼和25．c适应的草鱼相比．肌内线粒悻膜脂肪酸中不饱和 脂肪酸 ／饱和脂肪酸 (u／s)值明显升高，脂酰链平均长度也从 25℃时的 l9．08十碳原予增加到 lO℃时的20．d6个碳原子．而鲮鱼的脂肪酸组成在不同适应温度下的变化不明显．此外 ．还 出 了不同驯养温度下草鱼和艘鱼肌肉线粒体中胆圃醇古量的变化．发现两种鱼的胆同醇古t在低 温下都显著下降．作者认为，低温适应下的草鱼由于肌 内线粒体的脂肪酸组成和胆圊醇音量都发 生变化-因而其肌内线粒体膜的流动性明显增加I面鲢鱼肌内组织线粒体中照圈醇古量虽也藏 少-但脂肪酸组成空化甚擞，因此．鲮鱼肌 内组筝{境粒体膜灌动性增加程有限．这可能就是鲢鱼 葺I寒精力差的重要原固之一． 关键词 草鱼I鲢鱼}脂肪馥}胆 固醇#膜脂流动性I温度适应 经过长期特定环境的影响以及进化过程中的分化 ，不同的鱼类适应环境温度的能力有 了明显的差异。草鱼 (‰ 出瑚 m 邶．)是一种广温性鱼类 ，可 以在广泛的温度范围内生 存。鲮鱼 (c打 ∞如)属喜温性鱼类，对低温的耐受性差，当环境温度低于 7℃时便 开始死亡．造成鱼类温度适应能力差的原因，在于鱼类本身生理生化性能的差异 ，除神经 系统和新 陈代谢系统等的生理适应性调节能力以外 ，膜绪构的生理适应能力也是一个很重 要的方面．为了进二步弄清鲮鱼不耐低温的机理，并为彻底改善鲮鱼抗寒育种实践提供理 论嵌据，我们对不同驯养温度下鲮鱼肌肉组织线粒体膜的脂肪酸组成和胆固醇含量变化进 行了比较研究，并用草鱼作对照，比较二者在膜结构和组成上变化的差异，从另外一个方 面说明鲮鱼不耐寒的原因． 1 材料与方法 材料来源 ；草鱼为长江野生草鱼种，每尾重约 50B。鲮鱼系从广州购固的当年鱼苗 ．在 本所鱼塘养至儿 月份 ，每尾重 l0—15g．将两种鱼各分成两组，在 l0℃和 25℃的室内鱼 池中进行硐葬．持续时闻4周以上 ． 线粒体及线粒体膜脂的制备。将鱼断头后取背部白肌，采甩wod螈{(1978)法 “制‘备 ·现在牛南采王太学畜牧皋工竹 ． 1000—04--O1难牲 维普资讯 46 华 南 农 业 大 学 学 报 增刊 线粒体．用Folin--酚法 “”测定线粒体蛋 白质浓度 (用每毫升中所含蛋 白质的毫克数表示)。 将 Folch等 (1957)的方法Elo]略加改进后制备线粒体膜脂。 胆固醇含量的测定采用铁矾显色法E“。 采用快速酯交换法E进行脂肪酸 甲醇化．将 甲脂化脂肪酸用气相色谱 ／质谱联用法 (oc／Ms)对脂防酸组成进行定性分析，并用气耜色谱法(Gc)对脂肪酸各组分进行定量。 气相色谱条件：日本岛津 Gc一9A型气相色谱仪的色谱柱为岛津D 一300GC弹性 石英毛细管 ，柱长 5Om，内径 O．24mm ‘程序升温 ．初始温度为 l4O℃，保持 2min，然后 按 4℃／rain升至 280℃，保持到分析结束；采用氧火焰检测器 (FleD)，气化室和检测器温度 均为 300℃；用 N，作载气 ，cR一3A数据处理机进行结果分析 ．根据各峰面积计算各组分百 分比含量． 色谱 ／质谱联用条件 ：色 ／质联用仪为英国VG一7070E—HE塑质谱仪与美 国HP一 5790A塑气相色谱仪联用．色谱柱与色谱条件同上 ‘连接器温度 220℃，选用 Ⅱ 电离方式． 离子源温度 200℃，电子电离能量为 7Oev．加速电压 6kv．