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19 3 Vol. 19 No. 3
2001 5 CHINESE JOURNAL OF CHROMAT OGRAPHY M ay 2001
1 2 2 2 2
倪 莉 , 陶冠军, 戴 军, 王 璋 , 许时婴
( 1. , 350002; 2. , 214036)
: Alcalase , ( ACE)
Sep adex G15 ( RPHPLC) 20%
, ACE , GlyTyr
: ; ; ; ; ;
: O658 :A :2001)
; : 20 mL/ ; : 8802
1
( ) ; : XWD1100
( ACE) ( ) ; : 220 nm
, ACE 2.2.3 RPHPLC 分离纯化丝素肽 HPLC :
, WatersT M 650E Advanced Protein Purification System
, , ( Waters ) ; : BondapakTM C P/ N
18
; , 84 176( 7. 8 mm i. d. 300 mm) ( Waters
, , ) ; : Dual Absorbance Detector, 210 nm
, , 280 nm; : 200 L ~ 400 L; : 3
, mL/ min; : 0 min~ 10 min 100% A, 10 min
ACE [ 1~ 4] , ~ 20 min 0%B~ 50%B, 20 min~ 30 min 50% B, 30
, min~ 35 min 50% B~ 0% B, 35 min~ 38 min 100%
A( A ; B 30% )
[ 5]
, 2.2.4 氨基酸组成分析 83550
Alcalase , ACE ( Hitac i )
Sep adex G15 2. 2.5 谱鉴定 : Platform LCZ4000(
( RPHPLC) Waters ) ; : 3. 50 kV;
, : 120 ! ; : 200 ! ;
, : 100~ 900
2 3
2.1 3. 1 Sephadex G15
[5]
( ) , Alcalase( 2. 4 L) ( Alcalase ,
Novo ) , ACE ( ip 20%( A20) ACE
purlLHisLLeu) ( Sigma ) , [6]
A20
, [7]
, 0. 01 mol/ L HCl
2.2 ( 1) ,
2.2.1 ACE 抑制活性的测定 Cus ACE
[ 6]
man ,
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