血管紧张素转化酶活性抑制剂_丝素肽的分离_纯化与结构鉴定.pdfVIP

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19 3 Vol. 19 No. 3 2001 5 CHINESE JOURNAL OF CHROMAT OGRAPHY M ay 2001 1 2 2 2 2 倪 莉 , 陶冠军, 戴 军, 王 璋 , 许时婴 ( 1. , 350002; 2. , 214036) : Alcalase , ( ACE) Sep adex G15 ( RPHPLC) 20% , ACE , GlyTyr : ; ; ; ; ; : O658 :A :2001) ; : 20 mL/ ; : 8802 1 ( ) ; : XWD1100 ( ACE) ( ) ; : 220 nm , ACE 2.2.3 RPHPLC 分离纯化丝素肽 HPLC : , WatersT M 650E Advanced Protein Purification System , , ( Waters ) ; : BondapakTM C P/ N 18 ; , 84 176( 7. 8 mm i. d. 300 mm) ( Waters , , ) ; : Dual Absorbance Detector, 210 nm , , 280 nm; : 200 L ~ 400 L; : 3 , mL/ min; : 0 min~ 10 min 100% A, 10 min ACE [ 1~ 4] , ~ 20 min 0%B~ 50%B, 20 min~ 30 min 50% B, 30 , min~ 35 min 50% B~ 0% B, 35 min~ 38 min 100% A( A ; B 30% ) [ 5] , 2.2.4 氨基酸组成分析 83550 Alcalase , ACE ( Hitac i ) Sep adex G15 2. 2.5 谱鉴定 : Platform LCZ4000( ( RPHPLC) Waters ) ; : 3. 50 kV; , : 120 ! ; : 200 ! ; , : 100~ 900 2 3 2.1 3. 1 Sephadex G15 [5] ( ) , Alcalase( 2. 4 L) ( Alcalase , Novo ) , ACE ( ip 20%( A20) ACE purlLHisLLeu) ( Sigma ) , [6] A20 , [7] , 0. 01 mol/ L HCl 2.2 ( 1) , 2.2.1 ACE 抑制活性的测定 Cus ACE [ 6] man ,

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