应用重组抗原rSAG1检测IgM抗体诊断弓形虫病地研究.pdfVIP

ChinJSchistoControl2004，V01．15，No．2’133 中国血吸虫病防治杂志2004年第16卷第2期 6661(2004)02—013304 ·论著· [文章编号]l。。15 应用重组抗原(rSAGl)检测IgM抗体 诊断弓形虫病的研究 谈永飞2，印 鑫2，汤傻明1，司 进。，徐 明。，殷旭仁2，曹国群。，梁幼生2，朱荫昌。 [摘要] 目的以剐地弓形虫RH株重组主要表面抗原l作为检测抗原，建立检测弓形虫lgM抗 体的rSAGl-ELISA。方法用N·2+螫合柱纯化重组抗原rSAGl；以不同浓度的rSAGl的包被聚苯 乙烯酶标条，阳性和阴性混合血请分别作1：i00和1：200稀释，以辣根过氧化物酶标记的羊抗人 IgM为二抗，采用正交试验确定rSAGlELISA的最佳检测条件；按其最佳检测条件分别对弓形虫 IgM阳性和阴性混合血清重复测20次进行精确度的检测；采用抗体抑制试验检测其特异性；同时 对用进口试剂盒筛得的35份弓形虫IgM阳性血清和57份弓形虫lgM阴性血清进行检测。结果 制备的rSAGl重组蛋白纯度在90％以上；rSAGl一ELISA的最佳检测条件为：rSAGl的包被浓度为 2．5 l z 4 pg／ml，血清稀释度l；100，酶标记的羊抗人IgM000稀释；用rSAGI—ELISA对混合弓形 虫IgM阳性和阴性血清的重复检测表明：IgM阳性混合血清检测值的变异系数(cV值)为13．8％． t 50～1{200均可检出阳性{ IgM阴性混合血清的CV值为7．7％；灵敏度检测表明血清稀释度在1 特异性试验的抑制率为62．O％；rSAGl一El。ISA与进口试剂盒的总符合率为88o％，其中阳性和阴 性符台率分别为82．9％(29／35)和91．2％(52／57)。结论rSAGl一ELISA具有较好的灵敏度和特异 性，与进口试剂盒相比有较高的符合率，表明该法对弓形虫病早期诊断具有较高的价值，可进一步 推广应用。 [关键词] 弓形虫病；重组抗原；酶联免疫吸附试验}免疫诊断；IgM 8 [中围分类号]R531 [文献标识码]A DETECTIONOF ANTIBODYWITHRECOMBINANTANTIGENrSAGlFORTOXOPLAS— lgM din MOSISDIAGNOSISTan 2，Xu Xuren2， Yongfeil，YinXinl，TangJunming。，SiMin92．Yin Cao YixinⅣ。．1 214200， Guoqun2，LiangYoushen92，ZhuYinchan92(1People’sHospital，Yixin Institute China}2 ofParasiticDiseases，China) Jiangsu To with fusion establish rSAGl for [Abstract]Objective rSAGl一lgM—·ELISApurified protein of TherSAGlfusion was Ni4_col— toxoplasmosis．Methodsproteinpurifiedby immunodiagnosis was with of with unln．TbeE1．ISA coated differen