动物实验一般知识与基本操作技术(完美版).doc

动物实验一般知识与基本操作技术 一、动物实验一般知识 1．动物实验的种类和特点 （1）急性实验 就是用活体解剖的方法，把失去知觉的动物（全麻或局麻下）某一功能系统、器官或组织，暴露于直视之下，或置于实验仪器的准确控制之下（活体解剖实验方法）；或用适当的方法把所需器官或组织从动物体内取出，置于人工环境中，给予人工处置（离体器官实验方法），然后观察其活动与反应，以研究其功能或其对某种外加因素的反应及其机制的一类动物实验的总称。本实验指导中介绍的实验基本上都属于急性实验。 急性实验的优点是，通过对实验条件的严格控制，可排除一些复杂因素的影响，在较短时间内获得较多的有价值的分析材料。其缺点是，由于动物处于失常状态，如麻醉、创伤、失血等，使实验结果不能完全反映整体动物在生理条件下功能活动的规律。 （2）慢性实验 是指在无菌条件下，给动物施行一定的实验外科手术（例如各种造瘘术、脏器的切除或移植），待其恢复健康后再行实验和观察；或者将一定的物理性、化学性和生物性等致病因素作用于动物，复制成各种疾病模型，详细研究和观察疾病的发生、发展的规律或各种实验性治疗措施的效果。 慢性实验的最大优点是保持了实验动物机体的完整及其与外界环境的统一性，动物处于比较接近自然的生活状态。因此，所观察到的实验结果比较符合于客观实际，也比较正确可靠，但由于观察时间长，对实验设备和技术要求高，影响因素较多，费的人力也比较多等，因而难度较大。故基础课教学中较少采用，而广泛应用于研究工作中。 2．实验前动物的准备 一般动物在实验前禁食12小时，但饮水不限。进行慢性实验，在手术前数天便应对动物进行训练，以了解该动物是否适合做此实验，并使其熟悉环境与实验者，同时应加强营养的补充。手术前一天要给动物剃毛，必要时洗澡，以便于消毒处理。动物手术后，宜由实验者亲自护理和喂养，以进一步熟悉动物。 二、急性动物实验的基本操作技术 （一）动物基本操作技术 1．切口和止血 用哺乳动物进行实验时，在做皮肤切口之前，应先将预定部位及其周围的长毛剪去。然后选好确切的切口部位和范围，必要时做出标志。切口的大小要适当，既要便于实验操作，但也不可过大。术者先用左手拇指和另外四指将预定切口上端两侧的皮肤绷紧固定，右手持手术刀，以适当的力量，一次全线切开皮肤和皮下组织，直至肌层表面。若肌纤维走行方向与切口方向一致，可剪开肌膜，用手术刀柄或手指将肌纤维钝性分离至所需长度，否则便需将肌肉横行切断。切口由外向内，应外大内小，以便观察和止血。 在手术过程中，必须及时注意止血。微血管渗血，用温热盐水纱布轻压即可止血。干纱布只用于吸血，不可用以揩擦组织，以防组织损伤和血凝块脱落。较大血管出血，需先用止血钳将出血点及其周围的少许部分组织一并夹住，然后用线结扎。更大血管出血，或血管虽不很大，但出血点较多且比较集中（如肌肉的横断面），最好用针线缝过局部组织，进行贯穿结扎，以免结线松脱。大动脉破裂出血时，切不可用有齿的镊子或血管钳直接夹住管壁，而应先用纱布压住出血部位，吸干血后，小心打开纱布，观察出血点位置，迅速用手指捏住动脉破裂处，用动脉夹夹住血管近心端，再作进一步处理。 开颅过程中如果颅骨出血，可用湿纱布吸去血液后，迅速用骨蜡涂抹止血。如遇硬脑膜上的血管出血，可结扎血管断头，或用烧灼器封口。如果是软脑膜出血，应该轻轻压上止血海绵。 在实验间歇期间，应将创口暂闭合，或用温盐水纱布盖好，以防组织干燥和体内热量散失。 2．肌肉、神经与血管的分离 分离肌肉时，应该用止血钳在整块肌肉与其他组织之间，顺着肌纤维方向，将肌肉一块块地分离。决不能在一块肌肉的肌纤维间任意穿插。如果在肌肉纤维间操作，不仅容易损伤肌纤维而引起出血，并且也很难将肌肉分离。若必须将肌肉切断，应先用两把止血钳夹住肌肉（小块或薄片肌肉也可用两道丝线结扎），然后在两止血钳间切断肌肉。 神经和血管都是比较娇嫩的组织，因此在剥离过程中要耐心、仔细、动作轻柔。切不可用带齿的镊子进行剥离，也不许用止血钳或镊子夹持，以免其结构或机能受损。在剥离粗大的神经、血管时，应先用蚊式止血钳将神经或血管周围的结缔组织稍加分离，然后用大小适宜的止血钳将其从其周围的结缔组织中游离出来。游离段的长短，视需要而定。在剥离细小的神经或血管时，要特别注意保持局部的自然解剖位置，不要把结构关系弄乱，同时需要用眼科小镊子或玻璃针轻轻地进行分离。 剥离完毕后，在神经或血管的下方穿以浸透生理盐水的缚线（根据需要穿一根或两根），以备刺激时提起或结扎之用。然后盖上一块浸以生理盐水的棉絮或纱布，以防组织干燥，或在创口内滴加适量温热（37℃左右）石蜡油，使神经浸泡其中。